淺談凝膠成像分析系統(tǒng)組成及各部件性能

發(fā)布時(shí)間:2024-04-12
凝膠成像系統(tǒng)的基本骨包含:ccd相機(jī),暗室和分析軟件。不過(guò)其功能不僅**于對(duì)瓊脂糠凝膠進(jìn)行成像,現(xiàn)在的成像儀趨向于多功能化,還適用于蛋白膠、發(fā)熒光的膠、印跡膜和菌落平板等應(yīng)用。 在western blot方面,性能的ccd分子成像系統(tǒng)能與膠片媲美。 ccd是電荷耦合器件(charge coupled device)的英文名稱(chēng)縮寫(xiě),是種光電轉(zhuǎn)換器件。是凝膠圖像系統(tǒng)的核心部件。大多數(shù)對(duì)數(shù)碼相機(jī)都有定的了解,不少人還是這方面的專(zhuān)。有人把數(shù)碼相機(jī)的像素看得很重,但比較之后發(fā)現(xiàn),有些400萬(wàn)、500萬(wàn)像素的相機(jī)拍出來(lái)的片子沒(méi)有300像素的機(jī)子拍出來(lái)的好,這是為什么? 其實(shí),影響凝膠成像的因素很多,衡量ccd好壞的指標(biāo),有分辨率,ccd尺寸,動(dòng)態(tài)范圍,靈敏度,量子效率,信噪比等,其中像素?cái)?shù)以及ccd尺寸是重要的指標(biāo)。其實(shí)是說(shuō)感光器件的面積大小,這里就包括了ccd感光器件的面積越大,也即ccd面積越大,捕獲的光子越多,感光性能越好,信噪比越低。 為了方便您更了解ccd的大小,現(xiàn)列舉目前市場(chǎng)上所應(yīng)用的ccd規(guī)格如下: 1英寸——靶面尺寸為寬12.7mm*9.6mm,對(duì)角線16mm。 2/3英寸——靶面尺寸為寬8.8mm*6.6mm,對(duì)角線11mm。 1/2英寸——靶面尺寸為寬6.4mm*4.8mm,對(duì)角線8mm。 1/3英寸——靶面尺寸為寬4.8mm*3.6mm,對(duì)角線6mm。 1/4英寸——靶面尺寸為寬3.2mm*2.4mm,對(duì)角線4mm。 ccd的分辨率由低到: 133萬(wàn)左右,300萬(wàn)左右,500萬(wàn)左右,甚至還有更的,根據(jù)ccd的溫度有可以分為常溫ccd相機(jī)和制冷ccd相機(jī),制冷ccd:在相同滿井電子的ccd,降低ccd噪音,就能提ccd的監(jiān)測(cè)能力,熱或者暗電流對(duì)于ccd都是噪音,噪音在cool ccd基本都可以被深度致冷的peltier消除。在曝光超過(guò)5-10秒,ccd芯片就會(huì)發(fā)熱,沒(méi)有致冷設(shè)備的芯片,“熱”或者白的像素點(diǎn)就會(huì)遮蓋圖像,圖像到處可見(jiàn)雪花。ccd結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)、數(shù)字化的方法等都會(huì)影響噪音的產(chǎn)生。當(dāng)然通過(guò)改善凝膠成像系統(tǒng)結(jié)構(gòu)、化方法,同樣能減少噪音的產(chǎn)生。 熒光及化學(xué)發(fā)光本身較弱,所以對(duì)ccd噪音的降低要求很,應(yīng)選用分辨率數(shù)字冷卻ccd相機(jī)結(jié)合通透鏡頭系統(tǒng),使其能夠捕獲到信號(hào)其微弱的熒光及化學(xué)發(fā)光樣品圖像,并且能夠大程度的降低噪音,減少背景,出色的圖像清晰度。另外可選激發(fā)光源及多位濾鏡輪擴(kuò)大了熒光/化學(xué)發(fā)光成像的應(yīng)用范圍。所以般在熒光及化學(xué)發(fā)光觀察時(shí)需要選擇制冷ccd。所以制冷ccd相機(jī)是端分子影像成像分析系統(tǒng)的未來(lái)的發(fā)展趨勢(shì)和必須要求。
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