1 廣西醫(yī)科大學(xué)化學(xué)教研室 2 廣西醫(yī)科大學(xué)病理生理教研室、臨床免疫研究室
(南寧 530021)
摘要 目的：觀察茉莉花茶、綠茶浸出液的免疫調(diào)節(jié)和抑菌效應(yīng)。方法：配制系列濃度的茉莉花茶、綠茶浸出液，觀察其對(duì)中性粒細(xì)胞吞噬實(shí)驗(yàn)以及淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的影響以及對(duì)多種細(xì)菌增殖的抑制效果。結(jié)果：較高濃度茉莉花茶、綠茶浸出液均可以明顯提高脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率，兩者無(wú)顯著差異；但對(duì)中性粒細(xì)胞吞噬率無(wú)明顯影響，對(duì)多種細(xì)菌的抑菌圈直徑是6.0mm至13.0mm。結(jié)論：茉莉花茶、綠茶浸出液均有一定的免疫促進(jìn)效應(yīng)和抑菌趨勢(shì)。
關(guān)鍵詞：茉莉花茶 綠茶 免疫 抑菌
綠茶是未經(jīng)發(fā)酵處理的山茶屬小葉茶的干燥葉片，是大眾喜愛(ài)的保健茶品，在綠茶中加入茉莉花制成的茉莉花茶，因其特有花香味而為眾多的飲茶者喜愛(ài)。本實(shí)驗(yàn)采用兩者的浸出液進(jìn)行細(xì)胞免疫和抑菌方面實(shí)驗(yàn)，觀察兩者的生理與生物學(xué)性狀，探討其保健效應(yīng)的可能機(jī)理。
1、材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)茶葉與浸出液制備：橫縣綠茶與茉莉花茶，由橫縣茶協(xié)會(huì)提供。綠茶與茉莉花茶浸出液制備：將10克茶加入100 ml 90℃雙蒸水中浸泡30分鐘，加入0.8克氯化鈉配成等滲原液，0.22 um微孔除菌過(guò)濾，收集濾液備用。
1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：25只，sd大鼠200~250克，雄性，balb/c小鼠25~30克，10只。
1.3實(shí)驗(yàn)分組與檢測(cè)指標(biāo)
1.3.1 實(shí)驗(yàn)分組：（1）對(duì)照組：在反應(yīng)體系中加入1/5體積生理鹽水。（2）綠茶gpa組與茉莉花茶fpa組：在反應(yīng)體系中對(duì)應(yīng)加入1/5體積的綠茶與茉莉花茶原液。（3）綠茶gpb組與茉莉花茶fpb組：在反應(yīng)體系中對(duì)應(yīng)加入1/10體積的綠茶與茉莉花茶原液。（4）綠茶gpc組與茉莉花茶fpc組：在反應(yīng)體系中對(duì)應(yīng)加入1/20體積的綠茶與茉莉花茶原液。
1.3.2 免疫調(diào)節(jié)實(shí)驗(yàn)：
1.3.2.1 中性粒細(xì)胞吞噬實(shí)驗(yàn)：取sd大鼠腹主動(dòng)脈抽取抗凝血，采用明膠生理鹽水沉淀法分離血中性白細(xì)胞，調(diào)細(xì)胞濃度為1.0×106/ml，取0.2ml用血漿配置細(xì)胞懸液，加入5ul 滅活金葡菌懸液（1×1010/ml），然后根據(jù)分組按比例加入綠茶與茉莉花茶原液，37℃孵浴30分鐘，取細(xì)胞懸液制片，wright`s 染色， 油鏡下觀察200個(gè)中性粒細(xì)胞吞噬細(xì)菌的情況，計(jì)算吞噬率，進(jìn)行10個(gè)樣本檢測(cè)。
1.3.2.2 小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)：取balb/c小鼠脾，撕碎，采用淋巴細(xì)胞分離液分離和純化脾淋巴細(xì)胞，調(diào)細(xì)胞濃度為1.0×106/ml，在96孔板中每孔加入100 ul細(xì)胞懸液，并按3.1的實(shí)驗(yàn)分組按比例加入綠茶與茉莉花茶原液，在含pha培養(yǎng)液中培養(yǎng)72小時(shí)，取細(xì)胞懸液制片，吉姆薩-瑞氏染色， 油鏡下觀察200個(gè)細(xì)胞中轉(zhuǎn)化的淋巴細(xì)胞，計(jì)算淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率。每個(gè)實(shí)驗(yàn)組為6個(gè)復(fù)孔。
1.3.3 抑菌實(shí)驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)抑菌紙?jiān)嚻闹苽洌喝≈睆?.0mm的無(wú)菌濾紙片，浸入兩種茶液原液中，涼干備用。細(xì)菌選擇：銅綠假單胞 、摩根氏菌、粘質(zhì)沙雷氏菌 、 肺炎克雷伯菌 、金葡（mrsa）、金葡（25923）、溶血性葡萄球菌 。在接種好細(xì)菌后，采用貼濾紙片法觀察抑菌圈，并測(cè)定抑菌圈直徑大小。
1.3.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：數(shù)據(jù)采用t或t` 檢驗(yàn)進(jìn)行處理。
2 、結(jié)果
2.1 茉莉花茶、綠茶浸出液的免疫調(diào)節(jié)情況：具體見(jiàn)表1。茉莉花茶、綠茶浸出液對(duì)中性粒細(xì)胞的吞噬率無(wú)明顯的提高，而且兩者在各濃度組之間的差異也無(wú)顯著意義。在較高濃度的gpa、gpb、fpa、fpb組中，脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率均維持在52.6%~63.2%之間，除fpb外，均明顯高于對(duì)照組的40.1%脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率，但以上四組間無(wú)顯著差異。此外脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率在fpb組有升高趨勢(shì)。
2.2 茉莉花茶、綠茶浸出液對(duì)中性粒細(xì)胞吞噬率與脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的影響
組別 中性粒細(xì)胞吞噬率（%） 脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率（%）
（n=10） （n=6）
gpa 78.6+8.2 63.2+8.5*
gpb 72.4+12.3 59.4+7.9*
gpc 76.3+6.3&nbs