轉(zhuǎn)染5步驟：
第一步：獲取目標(biāo)細(xì)胞
第二步：混合和結(jié)合
轉(zhuǎn)移至lonza認(rèn)證的電轉(zhuǎn)杯或電轉(zhuǎn)板條中
第三步：選擇nucleofector程序，放入電轉(zhuǎn)耗材，按下開始按鈕
第四步：用培養(yǎng)基將電轉(zhuǎn)耗材的細(xì)胞轉(zhuǎn)移出來
第五步：轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)m中。nucleofectionmm電轉(zhuǎn)后3-8小時即可檢驗
提高核轉(zhuǎn)效率8個tips：
1.準(zhǔn)備好加了新鮮培養(yǎng)基的多孔板，并在實驗前于37°c下預(yù)平衡
2.使用傳代次數(shù)少并具有推薦融合度或密度（對數(shù)生長）的細(xì)胞
3.限制胰蛋白酶暴露時間，仔細(xì)監(jiān)測細(xì)胞分離情況
4.根據(jù)優(yōu)化方案進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)并使用適量細(xì)胞數(shù)；所用細(xì)胞過少可能導(dǎo)致細(xì)胞死亡率增加
5.采用高質(zhì)量dna，使用內(nèi)毒素去除試劑盒進(jìn)行純化；請通過測定a260:a280比值檢查各質(zhì)粒制備液的純度
6.室溫下以離心速度80-100×g和方案規(guī)定的時間進(jìn)行離心
7.離心后加入nucleofector™溶液，混勻溶液/細(xì)胞沉淀制備成單細(xì)胞懸液，避免對細(xì)胞沉淀進(jìn)行額外操作或用移液器槍頭抽吸
8.nucleofection™核轉(zhuǎn)后，用核轉(zhuǎn)試劑盒內(nèi)配的一次性移液管在電轉(zhuǎn)耗材中的細(xì)胞頂部加入約500μl預(yù)熱培養(yǎng)基