預(yù)混or非預(yù)混,rna建庫(kù)試劑盒,你pick哪個(gè)呢?
rna測(cè)序,又稱為轉(zhuǎn)錄組測(cè)序,是高通量測(cè)序中應(yīng)用非常廣泛的組學(xué)技術(shù)之一。其研究應(yīng)用有:不同處理組差異基因表達(dá)分析;
mrna表達(dá)量的差異研究;
mrna結(jié)構(gòu)上的差異(可變剪接、融合基因、點(diǎn)突變(snp)。
rna測(cè)序?qū)嶒?yàn)流程如下:目前,翌圣生物rna建庫(kù)試劑盒不斷進(jìn)行升級(jí),試劑盒越來(lái)越便捷,快速。
圖.翌圣生物rna建庫(kù)試劑盒進(jìn)化軸
目前,rna建庫(kù)試劑盒已經(jīng)進(jìn)化到預(yù)混版建庫(kù)試劑盒,試劑組分已經(jīng)簡(jiǎn)化,每步操作只加一次試劑即可進(jìn)行pcr。圖.非預(yù)混和預(yù)混版建庫(kù)試劑盒組分對(duì)比預(yù)混版建庫(kù)試劑盒,在操作上節(jié)省人力時(shí)間,而且單次樣本越多,效果越明顯。本次對(duì)比的試劑盒為翌圣非預(yù)混版建庫(kù)試劑盒(12308)和預(yù)混版建庫(kù)試劑盒(12310)進(jìn)行操作比對(duì),實(shí)驗(yàn)室,使用8個(gè)樣本進(jìn)行mrna建庫(kù)。圖.實(shí)驗(yàn)對(duì)比(12308es vs 12310es)
#操作詳解011st cdna合成該步驟對(duì)片段化后的rna進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,預(yù)混版rna建庫(kù),只需要將1st模塊試劑加入片段化后的rna即可進(jìn)行pcr,而非預(yù)混rna建庫(kù)試劑盒,需要分開(kāi)添加1st逆轉(zhuǎn)錄酶和1st逆轉(zhuǎn)錄酶buffer。
022nd合成步驟該步驟承接1st cdna合成步驟進(jìn)行二鏈互補(bǔ)鏈合成以及末修、加a等步驟。預(yù)混版rna建庫(kù)試劑盒,只需要將完成1st cdna pcr步驟的試劑拿出,直接加入2nd 合成試劑即可進(jìn)行下步pcr操作,而非預(yù)混rna建庫(kù)試劑盒,需要分開(kāi)添加2nd合成buffer和酶。
03接頭連接步驟該步驟承接2nd二鏈合成步驟,進(jìn)行后續(xù)接頭連接。預(yù)混版rna建庫(kù)試劑盒,只需要加入接頭連接模塊和接頭,即可進(jìn)行接頭pcr過(guò)程,而非預(yù)混版rna建庫(kù)試劑盒,需要分開(kāi)添加連接酶、連接buffer以及接頭。
后續(xù)pcr擴(kuò)增和文庫(kù)分選、文庫(kù)定量等步驟,操作流程類型,此處不再進(jìn)行贅述。整體看來(lái),預(yù)混版rna建庫(kù)試劑盒,不論是操作時(shí)間,還是操作的便捷度上,都有非常大的優(yōu)勢(shì)。尤其是在自動(dòng)化建庫(kù)時(shí),這種便捷度,能大大提高自動(dòng)化效率。心動(dòng)了嗎?聯(lián)系翌圣體驗(yàn)預(yù)混版建庫(kù)試劑盒的樂(lè)趣吧!
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