苗木組織培養(yǎng)是指在無(wú)菌條件下,給予苗木生長(zhǎng)的適宜環(huán)境 條件,在含有較全面營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基上對(duì)離體的苗木器官、組織、細(xì)胞、原生質(zhì)體等進(jìn)行人工培養(yǎng),最終獲得具有根、莖、葉的完 整植株,這個(gè)過(guò)程稱(chēng)為苗木組織培養(yǎng)。由于培養(yǎng)物脫離了苗木母 體,在試管或其他容器中進(jìn)行培養(yǎng),所以也叫離體培養(yǎng)。彩葉苗木組培的特點(diǎn)苗木組織培養(yǎng)技術(shù)應(yīng)用于彩葉苗木 的生產(chǎn)實(shí)踐,具有以下幾個(gè)特點(diǎn):繁殖速度快可在較短的時(shí)間內(nèi)繁殖大量的組培苗。例 如,一般木本苗木的增殖倍數(shù)為3.0,繼代周期為30〜40天,每年 如果繼代8次,理論上1個(gè)芽每年可繁殖2萬(wàn)株,100個(gè)芽1年可繁殖200萬(wàn)株性狀整齊一致的優(yōu)良苗木。生產(chǎn)脫毒苗通過(guò)莖尖脫毒技術(shù)結(jié)合熱處理,可以對(duì)病毒感染的植株進(jìn)行脫毒處理,為植株的進(jìn)一步栽培奠定良好的基礎(chǔ)。改良和培育新品種在培養(yǎng)基中添加誘變劑,或者采用轉(zhuǎn)基因技術(shù),可以改良彩葉苗木的某些性狀和品質(zhì),培育新品種。其他保持母本植株優(yōu)良性狀,獲得生長(zhǎng)整齊一致的植株。彩葉苗木組織培養(yǎng)的方法可用于組織培養(yǎng)的苗木材料很 多,包括根、蓮、葉、花、果實(shí)、種子等苗木器官,目前彩葉苗木的組織培養(yǎng)多采用苗木離體莖尖、側(cè)芽以及葉片、種子、胚等進(jìn)行培養(yǎng)。 在合適的培養(yǎng)條件下,將培養(yǎng)材料誘導(dǎo)形成芽,并且不斷進(jìn)行繼代 增殖培養(yǎng),再進(jìn)行生根培養(yǎng),最后移栽。使用這種方法,由開(kāi)始的 1個(gè)外植體在1年內(nèi)可以生長(zhǎng)數(shù)萬(wàn)植株。彩葉苗木的組織培養(yǎng)一般經(jīng)過(guò)以下幾個(gè)步驟-母株的確定—外植體采集—外植體滅菌— 接種—初代培養(yǎng)一繼代增殖培養(yǎng)—生根培養(yǎng)—煉苗移栽。(1)母株的確定用于苗木組織培養(yǎng)的母株,必須選擇生長(zhǎng)健壯、無(wú)病蟲(chóng)害、性狀優(yōu)良的單株。外植體采集一般取當(dāng)年萌發(fā)的帶腋芽的枝條做外植體。 取材時(shí)間最好在生長(zhǎng)幵始的季節(jié),生長(zhǎng)末期或已進(jìn)入休眠期采集 的外植體,對(duì)誘導(dǎo)培養(yǎng)反應(yīng)遲鈍或無(wú)反應(yīng),需要進(jìn)行低溫處理打破休眠,然后才可以進(jìn)行培養(yǎng)。取材最好選在中午或下午,避開(kāi)陰雨 天氣,可減少外植體污染率。此外,還要注意外植體器官的生理狀 態(tài)及發(fā)育年齡。一般情況下,幼年組織比老年組織具有較高的形態(tài)發(fā)生能力,也即幼年組織容易培養(yǎng)成功。外植體滅菌初代培養(yǎng)的外植體通常來(lái)自生長(zhǎng)在自然環(huán) 境下的植株,其表面通常攜帶有多種微生物,不能直接進(jìn)行培養(yǎng), 必須經(jīng)過(guò)表面滅菌處理,獲得無(wú)菌材料才能進(jìn)行培養(yǎng)。一般外植體滅菌步驟為:用加有少許洗潔精的水刷洗外植體一用流水沖洗 幾分鐘至數(shù)小時(shí)一在超凈工作臺(tái)上.用705^〜75“酒精滅菌30 秒并搖動(dòng)一用滅菌溶液滅菌,可以添加表面濕潤(rùn)劑吐溫-80數(shù)滴 并搖動(dòng)—無(wú)菌水沖洗3〜5次—接種。接種及初代培養(yǎng)將消毒好的外植體切割好后,放入啟動(dòng) 培養(yǎng)基,將外植體誘導(dǎo)出芽或者愈傷組織。不同的苗木材料初始 培養(yǎng)基不完全相同,一般誘導(dǎo)芽時(shí),苗木生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)濃度不需要太高,而誘導(dǎo)愈傷組織時(shí)則需要較高濃度的生長(zhǎng)素。繼代增殖培養(yǎng)為了獲得較多的無(wú)菌苗,必須將培養(yǎng)材料 進(jìn)行大量的增殖培養(yǎng)。通過(guò)調(diào)整培養(yǎng)基成分、苗木生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì) 用量,主要是細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的用量,以及二者之間的比例,達(dá)到快速增殖的目的。還可以通過(guò)調(diào)整培養(yǎng)溫度、光照等環(huán)境因 子,促進(jìn)組培苗的生長(zhǎng),達(dá)到快速繁殖的目的。生根培養(yǎng)外植體通過(guò)大量增殖后,多數(shù)情況下形成無(wú)根 的芽苗。有些容易生根的芽苗經(jīng)過(guò)壯苗培養(yǎng)后,也可以獲得生長(zhǎng) 一致的帶根小苗,可以煉苗移栽,省去誘導(dǎo)生根培養(yǎng)階段,但多數(shù)苗木的芽苗需要誘導(dǎo)生根后才能移栽。生根培養(yǎng)一般需要15〜30天,小苗生長(zhǎng)健壯,達(dá)到要求就可出瓶煉苗了。煉苗移栽組培苗長(zhǎng)期在弱光、恒溫、高濕的特殊環(huán)境中 生長(zhǎng),為了適應(yīng)移栽后的較低濕度及較高的光強(qiáng),在移栽之前必須 對(duì)組培苗進(jìn)行鍛煉以提高其適應(yīng)能力。煉苗時(shí)間的長(zhǎng)短要適宜,一般需要鍛煉2〜7天。組培苗經(jīng)過(guò)充分煉苗后,就要開(kāi)始移栽。移栽常用的基質(zhì)有 沙、蛭石、珍珠巖、草炭等,可以單獨(dú)使用,也可以按一定比例混合使用,基質(zhì)使用前最好用多菌靈等殺菌劑噴淋消毒,或用高溫蒸汽 消毒,以保證移栽的幼苗免受病蟲(chóng)侵害。移栽的具體方法為;將組培苗從培養(yǎng)瓶中輕輕取出,用清水洗 去小苗根系上附著的培養(yǎng)基,一定注意要盡量做到不損傷根系;有 時(shí)在栽苗前用多菌靈等殺菌劑浸根1〜2分,對(duì)提高移栽成活率也 有明顯的效果;小苗栽入營(yíng)養(yǎng)缽后必須及時(shí)澆水噴霧,然后扣小拱 棚保濕保溫,移栽初期溫度要保持在251左右,濕度在100%’如果外界光照過(guò)強(qiáng),還需要搭遮陰網(wǎng)遮陰;移栽1周后可以逐漸揭開(kāi) 拱棚通風(fēng),等到小植株長(zhǎng)出新葉,發(fā)出新根后可以完全去掉拱棚; 如果1次移栽苗木較多,還需要定期噴多菌靈等藥劑,防止病害發(fā) 生。苗木的組織快繁技術(shù)性很強(qiáng),由于篇幅所限,在這里不能詳細(xì)介紹