茶樹農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化系統(tǒng)和基因槍轉(zhuǎn)化系統(tǒng)的優(yōu)化

發(fā)布時(shí)間：2024-03-06

在用農(nóng)桿菌浸染前，將茶樹外植體預(yù)培養(yǎng)在含有pvp(po1yvinylpyrro1idone，16g/l)的預(yù)培養(yǎng)基上2-3d可提高轉(zhuǎn)化頻率。優(yōu)化后的茶樹基因槍轉(zhuǎn)化體系，即制彈程序：60mg／1m1鎢粉懸浮液10μ1中加入1．6μ1質(zhì)粒dna(1μg／μ1)，再分別加入0．1mol/l的亞精胺4μ1，2．5mol/l的cacl2l5μ1，最后定容至48μ1；每次轟擊上樣量為8—10μ1?；驑屴D(zhuǎn)化后抗性篩選2個(gè)月，抗性愈傷組織存活率為5．0％—12．1％。完成機(jī)構(gòu)：浙江大學(xué)茶葉研究所，浙江杭州310029