口腔癌是發(fā)生于口腔黏膜的惡性腫瘤,絕大多數(shù)為鱗狀細(xì)胞癌,包括發(fā)生于舌、頰、口底、唇、牙齦等黏膜的癌瘤?？谇话┌l(fā)病率高,且侵潤和轉(zhuǎn)移出現(xiàn)較早,目前臨床尚無好的治療方法,因此口腔癌動物模型的研究一直受到重視。
4-硝基喹啉-n-氧化物（4-nitroquinolinen-oxide，4-nqo）是一種水溶性喹啉衍生物，能夠通過氧化應(yīng)激損傷和抑制dna合成等機(jī)制誘導(dǎo)鱗狀細(xì)胞癌的產(chǎn)生。4-nqo誘導(dǎo)腫瘤的產(chǎn)生具有組織特異性，口服主要誘導(dǎo)口腔及上消化道系統(tǒng)腫瘤的形成，皮下注射主要誘導(dǎo)肺癌的形成。
圖14-nqo分子結(jié)構(gòu)
4-nqo誘導(dǎo)口腔癌建模步驟
動物：
4-nqo可以誘導(dǎo)大多數(shù)動物發(fā)生口腔癌，但是此類模型主要應(yīng)用于嚙齒類動物（如大鼠和小鼠）。
4-nqo的配置：
用無菌蒸餾水配成0.1%濃度, 置于4 ℃冰箱避光保存, 用時以自來水配成300 mg/l置于避光瓶內(nèi)自由飲用。
造模方法：
1、實(shí)驗(yàn)組68只小鼠為例：300 mg/l 4-nqo飲水喂養(yǎng)8～20周, 后改用自來水喂養(yǎng)至40周, 實(shí)驗(yàn)第9～40周每2周隨機(jī)處死4只；
2、對照組34只小鼠,自來水喂養(yǎng),實(shí)驗(yàn)第9～40周每2周隨機(jī)處死2只作為同期對照。
造模成功的指標(biāo)：
1.肉眼觀察：小鼠精神狀況、活動度、進(jìn)食、飲水量、飲藥量及毛色情況,每周記錄小鼠體質(zhì)量,飲水量,飲藥量。每周掰開小鼠口腔觀察口腔內(nèi)變化,記錄口腔內(nèi)黏膜色澤,質(zhì)地等是否改變,是否有斑塊、潰瘍或腫物出現(xiàn)。
2.h&e染色觀察：處死小鼠后立即取全舌、牙齦、口底、頰、腭、唇、頜下淋巴結(jié)、頜下腺、食管、胃、肝、脾、肺、腎、小腸、大腸等組織，進(jìn)行h&e染色，做病理學(xué)觀察。
3.免疫組化廣譜細(xì)胞角蛋白(pan-ck)染色觀察，pan-ck兔抗鼠多克隆抗體在癌細(xì)胞內(nèi)為陽性反應(yīng)。
應(yīng)用案例
圖2小鼠口腔癌頜下淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移大體及組織病理學(xué)觀察（引用自：doi:10.16190/j.ki.45-1211/r.2012.04.064）
a:28周時實(shí)驗(yàn)組一小鼠口底腫物(黑色方框內(nèi)) ;b:小鼠口底腫物為鱗狀細(xì)胞癌(he×200) ;c:小鼠雙側(cè)頜下淋巴結(jié)腫大(圖中黑色箭頭所指) ;d:淋巴結(jié)中已有轉(zhuǎn)移灶( (he×200) ;e:淋巴結(jié)廣譜細(xì)胞角蛋白染色陽性(ihc×200)。
相關(guān)產(chǎn)品
分類
產(chǎn)品名稱
貨號
規(guī)格
口腔癌動物建模試劑
4-nitroquinoline n-oxide 4-硝基喹啉-n-氧化物（4-nqo）
60392es72/80/90
250 mg/1/5g
yeasen提供4-nqo純度≥98%