抗原修復(fù)鍋的使用方法

發(fā)布時間:2025-01-13
抗原修復(fù)鍋antigenretriever
免疫組織化學(xué)方法成功與否關(guān)鍵在于抗原決定簇的保存和暴露.組織經(jīng)甲醛固定.甲醛的醛基與
抗原蛋白的氨基交聯(lián),使決定簇的構(gòu)像改變.從而影響檢測蛋白表達(dá).要充分暴露抗原決定簇,通
常用到抗原修復(fù)鍋。強(qiáng)適于甲醛固定的組織,經(jīng)石蠟包
埋后進(jìn)行免疫染色前的處理,配合特別的抗原修復(fù)緩沖液確保你得到搞質(zhì)量的免疫染色效
果。
·一次可以在6中不同緩沖液中運(yùn)行,進(jìn)行抗原暴露
·僅暴露抗原決定簇,不損傷組織的形態(tài)
·實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定,結(jié)果重現(xiàn)性高
·系列的玻片在獨(dú)立環(huán)境中經(jīng)過處理
抗原修復(fù)鍋怎樣工作?
看上去,抗原修復(fù)鍋似我們烹飪的高壓鍋。這是一款功能*的“高壓鍋”,主要用于抗原暴露
的工作,主要的工作原理也是裝玻片的幾個分室可以達(dá)到高溫(>120°c)高壓。靈敏的傳感控制
器來保持一定的溫度和壓力及一定的時間,這些工作參數(shù)都是經(jīng)過嚴(yán)格的科學(xué)實(shí)驗(yàn)得到的數(shù)
據(jù)。當(dāng)達(dá)到需要的溫度,抗原修復(fù)鍋會在該溫度下保持幾分鐘,之后鍋內(nèi)玻片被冷卻2個多小
時,特殊設(shè)材質(zhì)的內(nèi)鍋體控制了鍋和玻片的冷卻速度。
誰是受益人?
研究病理的實(shí)驗(yàn)室,那里需要高質(zhì)量染色照片(用來發(fā)表)的
缺乏技術(shù)人員的實(shí)驗(yàn)室,學(xué)生和博士后均可以處理玻片進(jìn)行組織染色,且不需要很多時間來摸索
小型病理實(shí)驗(yàn)室,每天處理的玻片數(shù)量有限
怎樣選擇一種緩沖液(buffer)
如果你已經(jīng)知道哪種緩沖液用在微波的某種組織抗原修復(fù),那么用抗原修復(fù)鍋時,這種緩沖
液也同時適用的機(jī)會很大。我們提供四種即用型緩沖液r-buffera/b/c/u,同時也提供同種更加
溫和的組織處理緩沖液,我們稱之g系列,r-bufferag/bg/cg/ug。
選擇buffer,主要考慮以下兩點(diǎn):
1.抗原的自然特性以及所選擇的抗體
抗原自身特性和抗原的位置都是首要考慮。我們建議你剛開始的時候選擇抗原表達(dá)環(huán)境的
適buffer。以下是經(jīng)驗(yàn)供大家參考:
mostofthenuclearantigens(apoptosis-related,survival-related,proliferation-r
elated)r:buffera(orag).
celladhesionmolecules,cellmembraneantigens(extracellulardomain)r:buffera(orag)
cytoskeletonandcytoskeleton-associatedmolecules–r:buffera(orag)
intracellulardomainofsomeadhesionmoleculesandsurfacereceptors–r:bufferb(orbg)
intracellulardomainofsomeadhesionmoleculesandsurfacereceptors–r:bufferc(orcg)
mostofantibodiesraisedagainstalinearpeptide–r:bufferu(orug)
2.固定液以及固定程度
建議的組織切片的抗原修復(fù)處理是一種針對普通的適化狀態(tài)切片。如果用來切片的組織塊沒有
充分固定,或者過固定(留在福爾馬林溶液中時間過長),或者用了其它的固定液,那么,處
理組織切片的流程方案需要重新修訂,便利的辦法是選擇使用g系列緩沖液。對于過固定的
材料一般*用ubuffer,或者在同一buffer里面增加循環(huán)
抗原修復(fù)鍋技術(shù)參數(shù):
heigh
335mm
capacity
9litres
max.instrumentlength
228mm
width.
340mm
netweight
4.5kilos
internalchamberdimensions(d/h)
210/230mm
max.loadweight
3.0kg
max.singlefaulttemperature
133.3°c
使用抗原修復(fù)鍋進(jìn)行染色的效果示例
1.福爾馬林固定,石蠟包埋,人乙狀結(jié)腸組織切片,經(jīng)抗原修復(fù)鍋進(jìn)行抗原暴露,r-
bufferc(ph6.0),組織玻片降溫過夜,抗體mib-1,抗原ki-67,r-detecthrp系統(tǒng)染色
2..福爾馬林固定,石蠟包埋,人乙狀結(jié)腸組織切片,經(jīng)抗原修復(fù)鍋進(jìn)行抗原暴露,r-
buffera(ph8.1),組織玻片降溫過夜,抗體#4b11,抗原cd8(cellmembrane),r-
detecthrp系統(tǒng)染色.
儀器及配件的選購:
貨號
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
62700-20
retriever220volt(內(nèi)含3個chamber)
1
62705-01
slidechamber
3/pk
62705-02
chamberrack
1
62705-03
liftingdevice
1
62705-05
cordset(europe)
1
緩沖液的選購:
貨號
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
62706-10
r-buffera(10x)
250ml
62706-11
r-bufferb(10x)
250ml
62706-12
r-bufferc(10x)
250ml
62706-13
r-bufferu(10x)
250ml
62707-10
r-bufferag(2x)
250ml
62707-11
r-bufferbg(2x)
250ml
62707-12
r-buffercg(2x)
250ml
62707-13
r-bufferug(2x)
250ml
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