中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)
gb 23200.17-2016
代替ny/t 1649-2008
食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)水果和蔬菜中噻菌靈殘留量的測定
液相色譜法
national food safety standards-determination of thiabendazole residue in fruits and vegetables liquid chromatography
前言
本標(biāo)準(zhǔn)代替ny/t 1649-2008《水果、蔬菜中噻苯咪唑殘留量的測定高效液相色譜法》。
本標(biāo)準(zhǔn)與ny/t 1649-2008相比主要修改如下：
——對標(biāo)準(zhǔn)名稱進行了修改，增加了食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)部分；
——根據(jù)食品安全標(biāo)準(zhǔn)的格式進行了修改。
——規(guī)范性引用文件中增加gb 2763《食品中農(nóng)藥最大殘留限量》標(biāo)準(zhǔn)；
——在試樣制備中增加了取樣部位的規(guī)定及細(xì)化了試樣制備的要求；
——增加了精密度要求。
1范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了蔬菜和水果中噻菌靈殘留量的高效液相色譜測定方法。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于蔬菜和水果中噻菌靈殘留量的測定。
2規(guī)范性引用文件
下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的應(yīng)用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。
gb 2763食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量
gb/t 6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法
3原理
樣品中噻菌靈經(jīng)甲醇提取后，根據(jù)噻菌靈在酸性條件下溶于水，堿性條件下溶于乙酸乙酯的原理，進行凈化，再經(jīng)反相色譜分離，紫外檢測器300nm檢測，根據(jù)保留時間定性，外標(biāo)法定量。
4試劑與材料
除非另有說明，在分析中僅使用確認(rèn)為分析純的試劑和符合gb/t 6682一級的水。
4.1試劑
4.1.1甲醇（ch3oh），色譜純。
4.1.2乙酸乙酯（ch3cooc2h5）。
4.1.3氯化鈉（nacl）。
4.1.4無水硫酸鈉（na2so4）：650℃灼燒4 h,干燥器中保存。
4.2溶液配制
4.2.1鹽酸溶液（0.1 mol/l）：吸取8.33 ml鹽酸，用水定容至1 l。
4.2.2氫氧化鈉溶液（1.0 mol/l）：稱取40 g氫氧化鈉，用水溶解，并定容至1 l。
4.3標(biāo)準(zhǔn)品
噻菌靈（cas 148-79-8）：純度大于99%。
4.4標(biāo)準(zhǔn)溶液配制
標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液(100 mg/ l)：準(zhǔn)確稱取噻菌靈0.0100 g，用甲醇溶解后，定容至100 ml，置4℃保存，有效期3個月。
5儀器與設(shè)備
5.1高效液相色譜儀，配有紫外檢測器。
5.2分析天平：感量0.01 g和0.1 mg。
5.3組織搗碎機。
5.4旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。
5.5機械往復(fù)式振蕩器。
5.6布氏漏斗。
6試樣制備
將蔬菜和水果樣品取樣部位按gb 2763-2014附錄a規(guī)定取樣，對于個體較小的樣品，取樣后全部處理；對于個體較大的基本均勻樣品，可在對稱軸或?qū)ΨQ面上分割或切成小塊后處理；對于細(xì)長、扁平或組分含量在各部分有差異的樣品，可在不同部位切取小片或截成小段或處理；取后的樣品將其切碎，充分混勻，用四分法取樣或直接放入組織搗碎機中搗碎成勻漿。勻漿放入聚乙烯瓶中于-16℃~ -20℃條件下保存。
7分析步驟
7.1提取及凈化
稱取10 g樣品，精確至0.01 g，放入250 ml具塞錐形瓶中，加40 ml甲醇，均質(zhì)1 min，在機械往復(fù)式振蕩器上振搖20 min，布氏漏斗抽濾，并用適量甲醇洗滌殘渣2次，合并濾液于150 ml梨形瓶中，在50℃下減壓蒸發(fā)至剩余5 ml ~10ml，用20 ml鹽酸溶液洗入250 ml分液漏斗中，加入20 ml乙酸乙酯振蕩、靜置，乙酸乙酯層再用20 ml鹽酸溶液萃取一次。合并水相用氫氧化鈉溶液調(diào)ph至8～9，加入4 g氯化鈉，移入250 ml分液漏斗中，用40 ml乙酸乙酯分別萃取2次，合并乙酸乙酯，經(jīng)無水硫酸鈉脫水，在50℃下減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)近干，殘渣用流動相溶解并定容至5 ml，經(jīng)0.45μm濾膜過濾后待測。
7.2液相色譜參考條件
檢測器：紫外檢測器。
色譜柱：c18, 4.6×250mm（5μm）或相當(dāng)者。
流動相：甲醇+水=50+50。
流速: 1.0 ml/min。
檢測波長：300 nm。
柱溫：室溫。
進樣量：10μl。
7.3標(biāo)準(zhǔn)工作曲線
吸取標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液0 ml、0.1 ml、0.5 ml、1 ml和2 ml，用流動相定容至10 ml，此標(biāo)準(zhǔn)系列質(zhì)量濃度為0 mg/l、1.00mg/l、5.00 mg/l、10.0 mg/l和20.0 mg/l，以測得峰面積為縱坐標(biāo)，對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，求回歸方程和相關(guān)系數(shù)。
7.4測定
將標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和待測溶液分別注入高效液相色譜儀中，以保留時間定性，以待測液峰面積代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中定量，樣品中噻菌靈質(zhì)量濃度應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)工作曲線質(zhì)量濃度范圍內(nèi)。同時做空白試驗。
8結(jié)果計算：
試料中噻菌靈殘留量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)ω計，單位以毫克每千克(mg/kg)表示，按公式（1）計算：
式中：
ρ——由標(biāo)準(zhǔn)曲線得出試樣溶液中噻菌靈的質(zhì)量濃度，單位為毫克每升（mg/l）；
v——最終定容體積，單位為毫升（ml）；
m——試樣質(zhì)量，單位為克（g）。
計算結(jié)果應(yīng)扣除空白值，計算結(jié)果以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，保留兩位有效數(shù)字。
9精密度
在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值與其算術(shù)平均值的比值（百分率），應(yīng)符合附錄a的要求。
在再現(xiàn)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值與其算術(shù)平均值的比值（百分率），應(yīng)符合附錄b的要求。
10定量限
本標(biāo)準(zhǔn)方法定量限為0.05mg/kg。
11色譜圖：
噻菌靈標(biāo)準(zhǔn)溶液圖譜見圖1。