秋行軍蟲卵巢細(xì)胞sf9克隆株操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、pbs放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量pbs潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量yi酶,使yi酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去yi酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止yi酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
重組食蟹猴 xcl1 蛋白 (his 標(biāo)簽)
重組大鼠 cxcl16 / sr-psox 蛋白 (his 標(biāo)簽)
重組人 cxcl12 / sdf-1 蛋白 (isoform a, his 標(biāo)簽)
重組人 xcl2 蛋白 (his 標(biāo)簽)
重組人 ccl15 / mip-5 / mip-1 delta 蛋白 (aa 46-113, his 標(biāo)簽)
重組人 xcl1 蛋白 (his 標(biāo)簽)
重組大鼠 nap-2 / ppbp / cxcl7 蛋白 (fc 標(biāo)簽)
重組小鼠 xcl1 蛋白 (his 標(biāo)簽)
重組人 cxcl12 / sdf-1 蛋白
重組人 ccl11 蛋白 (his 標(biāo)簽)
重組小鼠 i-309 / ccl1 / tca-3 蛋白 (fc 標(biāo)簽)
重組人 mcp-3 / ccl7 蛋白 (his 標(biāo)簽)
重組人 ccl14 / hcc-1 / hcc-3 蛋白 (aa 28-93, his 標(biāo)簽)
重組小鼠 ccl17 / tarc 蛋白
重組人 ccl14 / hcc-1 / hcc-3 蛋白 (his 標(biāo)簽)
重組人 ccl21 / 6ckine 蛋白
重組人 cxcl9 / mig / c-x-c motif chemokine 9 蛋白
重組小鼠 cxcl9 / mig / c-x-c motif chemokine 9 蛋白
重組食蟹猴 cxcl12 / sdf-1 蛋白 (fc 標(biāo)簽)
重組人 cxcl1 / mgsa / nap-3 蛋白 (his & nusa 標(biāo)簽)