紫外可見分光光度法定量分析
紫外可見分光光度法常用于定量分析，根據(jù)測量波長的范圍可分為可見光分光光度法和紫外分光光度法。前者用于有色物質(zhì)的測定，后者用于有紫外吸收的物質(zhì)的測定，兩者的測定原理和步驟相同，通過測定溶液對(duì)一定波長入射光的吸光度，依據(jù)朗伯—比爾定律，就可以求出溶液中物質(zhì)的濃度或含量。
1．單組分樣品的分析
若樣品為單組分的，且遵守吸收定律，只要測出被測物質(zhì)的吸收波長λmax，就可在此波長下，選用適當(dāng)?shù)膮⒈热芤?，測量溶液的吸光度，再用標(biāo)準(zhǔn)曲線法或比較法求得分析結(jié)果。
2．多組分樣品的分析
多組分是指在被測溶液中含有兩個(gè)或兩個(gè)以上的吸光組分。進(jìn)行多組分混合物定量分析的依據(jù)是吸光度具有加和性，假設(shè)樣品中同時(shí)存在兩個(gè)吸光組分x和y，需要先測定兩種組分的吸收曲線，對(duì)比其吸收波長，并計(jì)算出對(duì)應(yīng)的吸光系數(shù)。它們的吸收光譜一般有以下兩種情況：
①吸收光譜曲線不重疊。見圖1 -16(a)，若各組分的吸收曲線互不重疊，表明兩組分互不干擾，則可在各自吸收波長λ1和λ2處分別進(jìn)行測定。這本質(zhì)上與單組分測定沒有區(qū)別。
②吸收曲線互有重疊。見圖1 -16(b)，若各組分的吸收曲線互有重疊，表明兩組分測定時(shí)有相互干擾，在這種情況下，需要首先測定純物質(zhì)x和y分別在λ1和λ2處的吸光系數(shù)，再分別測定溶液在λ1和λ2處的吸光度，然后根據(jù)吸光度的加合性求解聯(lián)立方程組得出各組分的含量。
用這種方夠雖可以用于溶液中兩個(gè)或兩個(gè)以上的吸光組分的同時(shí)測定，但組分?jǐn)?shù)n>3結(jié)果誤差增大。近年來由于電子計(jì)算機(jī)的廣泛應(yīng)用，多組分的各種計(jì)算方法得到快速發(fā)展，提供了一種快速分析的服務(wù)。
3．高含量組分的測定-示差法
普通分光光度法一般只適于測定微量組分(10^-2～10^-64 mol/l)，當(dāng)待測組分含量較高時(shí)將產(chǎn)生較大的誤差，需采用示差法。該方法適用于分析τ%<10的組分。
方法是提高入射光強(qiáng)度，并采用濃度稍低于待測溶液濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液作參比溶液。
4．雙波長分光光度法
不需空白溶液作參比，但需要兩個(gè)單色器獲得兩束單色光，雙波長分光光度法適用于混合物和渾濁試樣的測定。由于采用同一個(gè)吸收池，消除了參比液和吸收池差異的影響，提高了方法的準(zhǔn)確度。
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