紫外可見分光光度法定量分析

發(fā)布時(shí)間:2024-07-31
紫外可見分光光度法定量分析
紫外可見分光光度法常用于定量分析,根據(jù)測量波長的范圍可分為可見光分光光度法和紫外分光光度法。前者用于有色物質(zhì)的測定,后者用于有紫外吸收的物質(zhì)的測定,兩者的測定原理和步驟相同,通過測定溶液對(duì)一定波長入射光的吸光度,依據(jù)朗伯—比爾定律,就可以求出溶液中物質(zhì)的濃度或含量。
1.單組分樣品的分析
若樣品為單組分的,且遵守吸收定律,只要測出被測物質(zhì)的吸收波長λmax,就可在此波長下,選用適當(dāng)?shù)膮⒈热芤?,測量溶液的吸光度,再用標(biāo)準(zhǔn)曲線法或比較法求得分析結(jié)果。
2.多組分樣品的分析
多組分是指在被測溶液中含有兩個(gè)或兩個(gè)以上的吸光組分。進(jìn)行多組分混合物定量分析的依據(jù)是吸光度具有加和性,假設(shè)樣品中同時(shí)存在兩個(gè)吸光組分x和y,需要先測定兩種組分的吸收曲線,對(duì)比其吸收波長,并計(jì)算出對(duì)應(yīng)的吸光系數(shù)。它們的吸收光譜一般有以下兩種情況:
①吸收光譜曲線不重疊。見圖1 -16(a),若各組分的吸收曲線互不重疊,表明兩組分互不干擾,則可在各自吸收波長λ1和λ2處分別進(jìn)行測定。這本質(zhì)上與單組分測定沒有區(qū)別。
②吸收曲線互有重疊。見圖1 -16(b),若各組分的吸收曲線互有重疊,表明兩組分測定時(shí)有相互干擾,在這種情況下,需要首先測定純物質(zhì)x和y分別在λ1和λ2處的吸光系數(shù),再分別測定溶液在λ1和λ2處的吸光度,然后根據(jù)吸光度的加合性求解聯(lián)立方程組得出各組分的含量。
用這種方夠雖可以用于溶液中兩個(gè)或兩個(gè)以上的吸光組分的同時(shí)測定,但組分?jǐn)?shù)n>3結(jié)果誤差增大。近年來由于電子計(jì)算機(jī)的廣泛應(yīng)用,多組分的各種計(jì)算方法得到快速發(fā)展,提供了一種快速分析的服務(wù)。
3.高含量組分的測定-示差法
普通分光光度法一般只適于測定微量組分(10^-2~10^-64 mol/l),當(dāng)待測組分含量較高時(shí)將產(chǎn)生較大的誤差,需采用示差法。該方法適用于分析τ%<10的組分。
方法是提高入射光強(qiáng)度,并采用濃度稍低于待測溶液濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液作參比溶液。
4.雙波長分光光度法
不需空白溶液作參比,但需要兩個(gè)單色器獲得兩束單色光,雙波長分光光度法適用于混合物和渾濁試樣的測定。由于采用同一個(gè)吸收池,消除了參比液和吸收池差異的影響,提高了方法的準(zhǔn)確度。
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