進(jìn)口c18色譜柱在不同ph環(huán)境下的選擇對于傳統(tǒng)c18色譜柱,ph值使用范圍通常為2-7,因為ph值高于8時c18固定相會受到限制。由于殘余硅羥基的存在,易對堿性化合物造成不可逆吸附,造成峰拖尾,影響分離與分析。ph值太低則會使鍵合的烷基脫落,而且對成分的分離達(dá)不到要求。
c18色譜柱不同ph環(huán)境下的選擇:
1.酸性條件
為改善c18色譜柱在低ph值時的穩(wěn)定性,有人提出了空間位阻方法??臻g位阻作用是指連接較大基團(tuán),立體阻礙溶質(zhì)基團(tuán)進(jìn)攻硅醇基,使硅氧烷能夠再生,提高了化學(xué)鍵合固定相抗水解的能力。還有人制備了側(cè)鏈中含有異丙基或異丁基的c18化學(xué)鍵合固定相。該固定相由于引入了較大的側(cè)鏈基團(tuán),立體阻礙了殘留硅醇基與溶質(zhì)之間的相互作用,在低ph值條件下能夠保持穩(wěn)定,這種化學(xué)鍵合固定相更適合酸性物質(zhì)的分離。
一種c18色譜柱使用空間位阻技術(shù),其使用單官能團(tuán)硅烷,具有較大的二異丁基(sb-c18)側(cè)鏈基團(tuán),空間位阻關(guān)鍵的硅氧烷鍵合到硅膠表面,以避免在低ph值條件下水解破壞,在酸性流動相條件下提供良好的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性。因此,該c18色譜柱成為低ph值方法開發(fā)的首要選擇。
2.堿性條件
制造快速分離堿性化合物的化學(xué)鍵合相一直是研究熱點。雙齒鍵合固定相的每個硅烷化分子中含有兩個硅原子,兩個硅原子之間以-o-或-ch2-ch2等基團(tuán)連接,每個硅原子含有1個c18官能團(tuán)。它的環(huán)狀結(jié)構(gòu)無論在低ph值條件下,還是高ph值條件下均顯示了較高的穩(wěn)定性和滿意的柱效。與傳統(tǒng)的單齒化學(xué)鍵合相相比,這種化學(xué)鍵合固定相突出的優(yōu)點是在低、中、高ph值時都有很好的穩(wěn)定性。使用c18雙齒化學(xué)鍵合固定相的c18色譜柱其耐受ph值達(dá)11.5,特別適合在高ph值的流動相條件下對強(qiáng)堿性化合物進(jìn)行有效的色譜分離。在開發(fā)普魯卡因有關(guān)物質(zhì)的藥物分析方法中,對比8種c18色譜柱,終選擇了耐受ph值范圍較大的c18色譜柱。