實時熒光定量PCR實驗時的注意事項

發(fā)布時間:2024-07-25
實時熒光定量pcr實驗需要先制備混合反應(yīng)液,大劑量包裝的反應(yīng)試劑,使用前進(jìn)行分裝,盡量減少試劑的反復(fù)凍融。建議所有樣本要有三個重復(fù)。實驗操作過程時需注意以下幾點,有利于避免實驗污染問題。1.用稀釋的漂白劑或凈化劑擦拭凈化臺。2.在的配有紫外燈超凈式或者超靜臺中準(zhǔn)備樣品,理想的是樣品的準(zhǔn)備與pcr的擴(kuò)增分開在不同的區(qū)域完成。3.在樣品制備和配制反應(yīng)過程中要勤換手頭。4.勤用稀釋的漂白劑擦拭移液器。5.只使用pcr級的水和pcr試劑進(jìn)行pcr實驗。5. 用帶旋蓋的 ep 管稀釋和配制反應(yīng)液。6. 在進(jìn)行 pcr 實驗時,還應(yīng)準(zhǔn)備一個無模板的對照來驗證有無污染發(fā)生,而且用熱啟動酶防止反應(yīng)開始之前的非特異性擴(kuò)增。在選擇適合做熒光定量pcr試劑凍干的凍干機時,,要具有完整的pat控制技術(shù),可對凍干過程進(jìn)行完整的控制和分析監(jiān)控。包括預(yù)凍全過程控制、預(yù)凍結(jié)束判定、升華全過程控制、升華結(jié)束判定、解析全過程控制及凍干結(jié)束判定。板層溫度均一度±1℃。系統(tǒng)極限真空度±1pa。系統(tǒng)真空泄露率<3pa.l/s。外界干擾熱量屏蔽。共晶點測試儀助力工藝開發(fā)。全進(jìn)口配件。建議提高熒光pcr凍干的相關(guān)性。
型號 pilot3-6t pilot5-8t pilot7-12t pilot10-15t
凍干面積 0.42㎡ 0.56㎡ 0.84㎡ 1.05㎡
∅22西林瓶裝量(20ml) ≥900支 ≥1170支 ≥1500支 ≥2100支
∅16西林瓶裝量(5ml) ≥1700支 ≥2210支 ≥3100支 ≥4100支
冷阱溫度(空載) -85℃
真空度(空載) ≤1pa
板層溫度(空載) -55℃
板層制冷方式 硅油循環(huán)
板層數(shù)量 3+1 4+1 4+1 5+1
板層尺寸(mm) 350*400 350*400 350*600 350*600
捕水能力 6l 8l 12l 10l
凍干效率 3l/24h 5l/24h 7l/24h 10l/24h
板層間距 100mm 80mm 90mm 100mm
穿墻隔離 √ √ √ √
凍干曲線擬合度 100% 100% 100% 100%
晶型控制 √ √ √ √
蒸汽分壓控制 √ √ √ √
升華結(jié)束判定 √ √ √ √
凍干終點測試 √ √ √ √
壓塞 液壓
整機尺寸 (約) w860*d1400*h1800 w860*d1400*h1800 w860*d1700*h1900 w860*d1700*h1900
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