除非特殊說明，在所有情況下，所用溶劑的體積應該是色譜柱體積的40~60倍。應在清洗過程開始和結束時各測一次柱效和容量因子等色譜參數(shù)，比較液相色譜儀色譜柱性能的改善，以確定清洗的效果。確保色譜柱中沒有樣品盒緩沖溶液，清洗前所用的溶劑應與zui初清洗時所用的溶劑相溶。應確保實驗測試時所用的流動相與色譜柱中zui后的溶劑相溶。
zui常見色譜柱再生用溶劑及其順序見下表：
填料類型
再生用溶劑及其順序
正相填料
用四氫呋喃沖洗；用甲醇沖洗；用四氫呋喃沖洗；二氯甲烷沖洗；用無本正己烷沖洗
反相填料
用hplv級水沖洗，沖洗時進4等份的200µl二甲亞砜；用甲醇沖洗；用氯仿沖洗；用甲醇沖洗；
陰離子交換填料
用hplc級水沖洗；用甲醇沖洗；用氯仿沖洗
陽離子交換填料
用hplc級水沖洗；在沖洗的過程中進4等份的200µl的dmso；四氫呋喃清洗
蛋白質凝膠過濾填料
去除蛋白質尺寸排阻介質中的污染有兩種清洗/再生的方法：1弱保留蛋白質，用30mol/l ph3.0磷酸鹽緩沖液沖洗；2強保留蛋白質，用99%的水到99%的乙腈梯度洗脫60min
關鍵詞：色譜柱 液相色譜儀