大鼠心肌細胞h9c2是一種廣泛用于研究心臟生理和心血管藥理學(xué)的細胞系。該細胞系起初是從雄性熱帶魚中分離出來的，但后來經(jīng)過改造被用來模擬人類心肌細胞。h9c2細胞具有許多與真實心肌細胞相似的特征，如收縮功能、細胞形態(tài)、代謝途徑和鈣離子內(nèi)流等。它們可以通過在培養(yǎng)基中添加不同的藥物或刺激劑來激活或抑制不同的信號通路，進而模擬心臟疾病的表現(xiàn)和治療響應(yīng)。
大鼠心肌細胞h9c2有什么作用？
是一種常用的小鼠來源的肌細胞，廣泛應(yīng)用于心臟疾病、藥物篩選以及相關(guān)基礎(chǔ)研究領(lǐng)域。h9c2起初是由atcc(美國細胞庫)分離出來的，在體外培養(yǎng)中可以衍生成多個亞克隆種類并形成間充質(zhì)或纖維樣細胞，具有良好的增殖能力。h9c2主要分布于心臟，并具有與心肌細胞相似的特征和調(diào)控機制。因此，研究人員通常利用該細胞系來進行心臟疾病模型的構(gòu)建、心臟細胞生長影響因素的研究以及登記某些疾病發(fā)生機理等方面的探究。在心肌疾病方面，h9c2可用于模擬缺血再灌注、心肌梗死、長期高壓、細胞毒性等實驗條件，從而尋找治療藥物和探究相關(guān)信號傳導(dǎo)途徑等機制。同時，還可以通過基因編輯技術(shù)將其轉(zhuǎn)化為疾病模型進行深入研究。
以下是大鼠心肌細胞h9c2的培養(yǎng)方法：
1.所需物品：
1.1.帶血清dmem培養(yǎng)基(10%)
1.2.胰蛋白酶/edta0.25%
1.3.固定化牛血清白蛋白
2.步驟：
2.1.將培養(yǎng)皿室至co2孵化器中6小時以去除殘余輻射。
2.2.在(37℃和5%co2)下將80%的h9c2細胞傳遞到新鮮的75cm2培養(yǎng)皿中，細胞密度為1x106個/ml。
2.3.使用10ml帶血清dmem將每個細胞站洗滌兩次。
2.4.將細胞培養(yǎng)至80%移植和細胞滋潤。
2.5.當(dāng)分泌物微薄時，使用0.25%胰蛋白酶/edta進行細胞分離，并停止酶作用。
2.6.加入固定化牛血清白蛋白以去除不需要貼壁的細胞。
2.7.用6.ml帶血清dmem孵育細胞5-6天。
3.注意事項：
3.1.細胞應(yīng)在空氣-液體界面上被涂覆，并保持在co2(5%)中。
3.2.培養(yǎng)基的更換取決于對其使用頻率，細胞數(shù)量以及其他因素的考慮。一般建議每2-3天更換1次培養(yǎng)基。