檢測(cè)大腸菌群
標(biāo) 準(zhǔn)
gb/t 4789.3-2003 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸菌群測(cè)定
gb 4789.3-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 大腸菌群計(jì) 數(shù)
gb/t 5750.12-2006 生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法 微生物指標(biāo)
18204.4 公共用品用具微生物(這是公共場(chǎng)所的標(biāo)準(zhǔn)，其實(shí)可以用來(lái)做生產(chǎn)車間的用具和手部的檢測(cè)方法)
兩個(gè)版本的一些檢測(cè)方法和注意事項(xiàng)都說(shuō)了，那么我們說(shuō)一下一些朋友常問(wèn)的一些問(wèn)題。
1. 03版的結(jié)果能不能和10版的結(jié)果進(jìn)行換算和比較。
答：其實(shí)換算是不行的，這個(gè)兩個(gè)不同的標(biāo)準(zhǔn)。如果只是進(jìn)行比較兩個(gè)結(jié)果是可以的，但是不建議。
2.如何選擇檢測(cè)方法？
答：你要根據(jù)產(chǎn)品的執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)去選擇檢測(cè)方法，不是說(shuō)你喜歡那種就可以用那種。
3、同一批產(chǎn)品，檢測(cè)的兩份結(jié)果不一樣，是不是那里出問(wèn)題？
答：其實(shí)不是出問(wèn)題，這個(gè)是正常的，同一批產(chǎn)品不代表他們的微生物檢測(cè)結(jié)果是一模一樣的，如果是這樣也沒(méi)必要做五份去驗(yàn)證產(chǎn)品合格了吧？如果說(shuō)同一份樣品(制成一份樣)出現(xiàn)結(jié)果差好遠(yuǎn)的話，這里就要去分析那里出問(wèn)題。
gb/t 4789.3-2003 大腸菌群測(cè)定
03版只有一個(gè)方法：mpn法，也有人叫九管法。
陽(yáng)性的方法步驟：
制樣→接種到乳糖膽鹽發(fā)酵管→伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基→乳糖發(fā)酵管(同時(shí)做革蘭氏染色)→看表計(jì)算。
其實(shí)這個(gè)方法比較簡(jiǎn)單的一個(gè)方法，也是常說(shuō)的半定量的方法。
我們下面說(shuō)一下這個(gè)方法的注意事項(xiàng)。
第1，這個(gè)方法是一個(gè)半定量的方法，不好要用于測(cè)量審核上。
第二，做實(shí)驗(yàn)前要注意導(dǎo)管里是否有空氣(使用大直徑的小導(dǎo)管)，以免影響結(jié)果的判斷，增加工作量。
第三，經(jīng)常有人會(huì)無(wú)視標(biāo)準(zhǔn)有一個(gè)糞大腸的檢測(cè)步驟。這個(gè)很少人會(huì)去做。
第四，對(duì)伊紅美藍(lán)的陽(yáng)性現(xiàn)象不了解(其實(shí)實(shí)驗(yàn)室可以在做出陽(yáng)性結(jié)果之后，將菌接出來(lái)，以后用來(lái)做人員培訓(xùn))。
第五，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)是否還在實(shí)行不清楚，很多人在16版出來(lái)的時(shí)候，都在問(wèn)03版是不是也作廢了，其實(shí)并沒(méi)有。03版目前還在執(zhí)行著(畢竟還有些標(biāo)準(zhǔn)還在用著它的單位)。
gb 4789.3-2016 大腸菌群計(jì)數(shù)
這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)里有兩個(gè)方法：mpn法和平板計(jì)算。
首先說(shuō)mpn法，它相對(duì)于03版的mpn有一定的區(qū)別。第1這兩個(gè)方法用的培養(yǎng)基*不一樣。第二16版的方法沒(méi)有伊紅美藍(lán)畫(huà)線，這樣的過(guò)程減少了一步相對(duì)簡(jiǎn)單一點(diǎn)。第三單位變了。
平板法：其實(shí)平板是我們目前用得較多的一個(gè)方法，步驟看標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)流程圖。
那么平板法有什么注意的呢？
第1，做平板法的時(shí)候需要覆蓋第二層培養(yǎng)基，它的作用是：有助于典型菌落形成也為了防止蔓延性細(xì)菌生長(zhǎng)。
第二，挑菌，其實(shí)這一步主要怕挑菌的時(shí)候挑不到菌，其實(shí)你可以把帶菌的部分培養(yǎng)基*挑起來(lái)(不要怕培養(yǎng)基包含著它出不來(lái))放到bglb內(nèi)，然后用手腕力搖一下試管就可以把培養(yǎng)基打碎。
第三，計(jì)算問(wèn)題，標(biāo)準(zhǔn)挑取10個(gè)典型菌落。然后計(jì)算比例再乘以所有典型菌落的數(shù)(有人會(huì)在這里糾結(jié)，覺(jué)得不太準(zhǔn)確，應(yīng)該所有菌落都挑取)其實(shí)這個(gè)一個(gè)想法很好，但是這樣之后增加工作量的同時(shí)影響效率。其實(shí)在平板上你應(yīng)該區(qū)分典型菌落出來(lái)去做就可以(當(dāng)然這步要考驗(yàn)一個(gè)人的眼力和經(jīng)驗(yàn))初學(xué)者可以根據(jù)形態(tài)進(jìn)行分類，然后以形態(tài)特征進(jìn)行驗(yàn)證。