穩(wěn)定細胞有哪些？
屬于穩(wěn)定細胞的是腎小管上皮細胞及肝細胞。神經(jīng)細胞、心肌細胞和骨骼肌細胞屬于永jiu性細胞。男性及女性生殖管道被覆上皮細胞、淋巴造血細胞、表皮細胞都是不穩(wěn)定細胞。
穩(wěn)定細胞（stable cells)又稱靜止細胞（quiescent cell)。在生理情況下，這類細胞增殖細胞不明顯，在細胞增殖周期中處于靜止（g0），但受到組織損傷的刺激時，則進入dna合成前期（g1），表現(xiàn)出較強的再生能力。這類細胞包括各種腺體或腺樣器官的實質(zhì)細胞，如胰、涎腺、內(nèi)分泌腺、汗腺、皮脂腺和腎小管的上皮細胞等，由其構(gòu)成的組織處于分裂期的細胞低于1.5%。此類組織中的內(nèi)分泌腺和上皮無干細胞存在。
穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株的構(gòu)建有哪些原理及方法？
穩(wěn)轉(zhuǎn)株即穩(wěn)定表達的細胞株，指基于某一細胞系構(gòu)建的持續(xù)過表達或干擾某特定基因的細胞系。
穩(wěn)轉(zhuǎn)株的優(yōu)勢：
①通過建立穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系，可以降低頻繁轉(zhuǎn)染或者病毒包裝的成本，方便在目的細胞中研究基因功能實驗研究；
②區(qū)別于瞬時轉(zhuǎn)染只能干擾表達，無法去除已表達的目的蛋白，構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系可以實現(xiàn)更好的基因干擾效果；
③瞬轉(zhuǎn)會引入拷貝數(shù)的表達，導(dǎo)致因人為因素造成實驗結(jié)果的不精確，建立穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系可以幫助篩選拷貝數(shù)適量的細胞進行實驗研究；
④需要用誘導(dǎo)表達系統(tǒng)的，主要是一些致死基因或者是需要時空表達的。
穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建原理：
通過將外源dna/shrna克隆到帶有某種抗性基因的載體上，重組載體被轉(zhuǎn)染至宿主細胞并整合到其染色體中，并能隨細胞分裂穩(wěn)定傳遞下去，再用載體中所含抗性基因進行篩選。
穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建方法：
目前常用到的方法有脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染和病毒轉(zhuǎn)染，病毒有慢病毒（lentivirus），腺病毒（adenovirus），逆轉(zhuǎn)錄病毒（retrovirus）。
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