今日共享:ELISA試驗條件怎么挑選

發(fā)布時間:2024-04-19
在elisa中,進行各項試驗條件的挑選十分重要,今日我司就帶您大概了解一下試驗條件的挑選包含哪些:
1.固相載體的挑選:
載體的種類有多種,如聚苯乙烯,聚氯乙烯和纖維素等,我們通常用的聚苯乙烯塑料微量滴定板,其優(yōu)點在于吸附蛋白的性能較好,操作簡潔、用量小、適于大批檢測。
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2.載體的吸附條件:
載體的吸附均為物理吸附,吸附一般要求ph在9.0~9.6之間。時刻、溫度、蛋白的濃度、離子的強度必定要恰到好處。一般選用4℃過一夜。
3.酶標(biāo)抗體運用濃度的確認(rèn):
于聚苯乙烯板中加足夠的抗體包被溫育必定時刻, 酶標(biāo)結(jié)合物倍比稀釋,找出od值1,為zui合適酶標(biāo)抗體稀釋度。
4.抗原的要求:
用于elisa的抗原有必要選用適當(dāng)純的抗原,假如含有其它雜質(zhì),將與抗原共同競爭的固相載體上的有限位置。
5.抗體的要求:
必定是要與抗原對應(yīng)的抗體,化學(xué)結(jié)構(gòu)和空間結(jié)構(gòu)上其具有很高特異性反應(yīng)。
6.反應(yīng)時刻:
抗原與抗體、抗體與酶標(biāo)抗體反應(yīng)一般在37度1~2小時到達。時刻太短敏感性下降,時刻太長吸附的抗原或復(fù)合物可能掉落。
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