實時熒光定量pcr技術實現(xiàn)了pcr從定性到定量的飛躍，具有特異性更強、有效解決pcr污染問題、自動化程度高等特點，成為核酸分子定量的標準方法。在做熒光定量pcr實驗時建議使用這些耗材：96孔光學反應板配合光學膜，0.2ml光學八聯(lián)反應管配合光學膜，0.2ml光學八聯(lián)反應管配合平蓋的光學八聯(lián)管蓋等。在做熒光定量pcr實驗時有一些好的方法分享給大家，例如在使用單管或者8連管做實驗時，如果在樣本數(shù)量不多的時候，建議在樣品加熱塊（tray）上對稱的安放樣品，并且先放在第6列或者第7列，然后逐漸向兩邊放置。這樣熱蓋壓下來的時候不至于發(fā)生傾斜，每個反應管的受力和受熱都比較均勻，提高了孔與孔之間的數(shù)據(jù)精密性。又例如使用96孔板做實驗的時候，建議使用光學膜代替蓋子來密封反應孔。封膜的方法要先沿著96孔板的縱向壓膜，然后在橫向，后在沿著板的邊緣按壓密封。pilot5-8t凍干機應用示例（熒光pcr凍干）：
探針、底物、引物原料要求確定。凍干溶液配方開發(fā)，采用正交法或響應曲面法進行輔料篩選。選擇適合的包材和模具。設計凍干曲線配合輔料篩選。確定配方及工藝。穩(wěn)定性測試。根據(jù)穩(wěn)定性測試結(jié)果修正工藝或配方。整個環(huán)節(jié)注意環(huán)境、設備、人員的結(jié)合。
型號
pilot3-6t
pilot5-8t
pilot7-12t
pilot10-15t
凍干面積
0.42㎡
0.56㎡
0.84㎡
1.05㎡
∅22西林瓶裝量（20ml）
≥900支
≥1170支
≥1500支
≥2100支
∅16西林瓶裝量（5ml）
≥1700支
≥2210支
≥3100支
≥4100支
冷阱溫度（空載）
-85℃
真空度（空載）
≤1pa
板層溫度（空載）
-55℃
板層制冷方式
硅油循環(huán)
板層數(shù)量
3+1
4+1
4+1
5+1
板層尺寸（mm）
350*400
350*400
350*600
350*600
捕水能力
6l
8l
12l
10l
凍干效率
3l/24h
5l/24h
7l/24h
10l/24h
板層間距
100mm
80mm
90mm
100mm
穿墻隔離
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凍干曲線擬合度
100%
100%
100%
100%
晶型控制
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蒸汽分壓控制
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升華結(jié)束判定
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凍干終點測試
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壓塞
液壓
整機尺寸 （約）
w860*d1400*h1800
w860*d1400*h1800
w860*d1700*h1900
w860*d1700*h1900