核酸檢測(cè)試劑盒檢測(cè)時(shí)的RT-PCR原理講解

發(fā)布時(shí)間:2024-04-07
核酸檢測(cè)試劑盒里面裝的是核酸檢測(cè)的試劑,但是試劑盒它本身并不能檢測(cè)病毒,它是給檢測(cè)病毒的儀器設(shè)備提供的試劑和耗材。由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
核酸檢測(cè)試劑盒所用到的rt-pcr技術(shù)原理:
rt-pcr,實(shí)際上是反轉(zhuǎn)錄pcr,又稱逆轉(zhuǎn)錄pcr。國(guó)際上的約定俗成的是:rt-pcr特指反轉(zhuǎn)錄pcr,而real-time pcr一般縮寫為qpcr(quantitative real-time pcr)。
rt-pcr原理是提取組織或細(xì)胞中的總rna,以其中的mrna作為模板,采用隨機(jī)引物利用逆轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄稱cdna。再以cdna為模板進(jìn)行pcr擴(kuò)增,而獲得目的基因的表達(dá)。rt-pcr使rna檢測(cè)的靈敏性提高了幾個(gè)數(shù)量級(jí),使一些極為微量rna樣品分析成為可能。
rt-pcr技術(shù)靈敏而且用途廣泛,可用檢測(cè)細(xì)胞、組織中基因表達(dá)水平,細(xì)胞中rna病毒的含量和直接克隆特點(diǎn)基因的cdna序列等。如果用于定量檢測(cè),就是qpcr,此次病毒核酸檢測(cè)熒光pcr技術(shù)就是基于此。
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