摘要：鹵代苯甲醚污染會(huì)導(dǎo)致軟木塞變質(zhì)，從而使受影響的葡萄酒散發(fā)出一種霉味。每年，軟木塞污染都會(huì)使葡萄酒及其相關(guān)行業(yè)遭受重大的經(jīng)濟(jì)損失。本研究將頂空-固相微萃取(hs-spme) 與 agilent 7890a 氣相色譜和 agilent 7000b 三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用，對(duì)葡萄酒進(jìn)行測(cè)定得到定量限 (loq)，其中 tca 為 0.5 ng/l。teca、tba 和 pca 的 loq ≤ 1.0 ng/l。這些定量限均低于鹵代苯甲醚在葡萄酒中的感覺(jué)閾值水平。本方法實(shí)現(xiàn)了*自動(dòng)化，僅需添加內(nèi)標(biāo)即可完成方法，萃取時(shí)間為 10 min，具有較高的分析通量。
前言即使在痕量水平下，鹵代苯甲醚（例如 2,4,6-三氯苯甲醚 (tca)、2,3,4,6-四氯苯甲醚 (teca)、2,3,4,5,6-五氯苯甲醚 (pca) 和 2,4,6-三溴苯甲醚 (tba)）仍會(huì)使很多食品和飲料散發(fā)一種發(fā)霉的氣味。在葡萄酒中，這種污染通常被稱(chēng)為軟木塞污染，市場(chǎng)上大約有1% - 5% 的葡萄酒會(huì)受此影響，從而使經(jīng)濟(jì)遭受巨大的損失。盡管有時(shí)會(huì)涉及到橡木桶和酒莊其他相關(guān)來(lái)源，但葡萄酒中鹵代苯甲醚污染的來(lái)源仍以受污染的軟木塞為主。鹵代苯甲醚具有低至 ng/l 范圍的感覺(jué)閾值（葡萄酒中的 tca 約為 3 ng/l），因此需要一種高靈敏度、高特異性的分析方法來(lái)定量分析葡萄酒中的鹵代苯甲醚。大多數(shù)酒莊和軟木塞供應(yīng)商已建立了詳細(xì)的質(zhì)量控制分析程序，包括整個(gè)加工和儲(chǔ)存過(guò)程中對(duì)軟木堆和葡萄酒樣品中鹵代苯甲醚濃度進(jìn)行的常規(guī)監(jiān)測(cè)，因此需要一種高通量的分析方法。很多鹵代苯甲醚都通過(guò) hs-spme 方法進(jìn)行分析，但因其萃取時(shí)間通常大于 20 min，極大限制了生產(chǎn)環(huán)境中的分析速度。另外，很多方法都未使用穩(wěn)定的同位素內(nèi)標(biāo)來(lái)保證定量分析的準(zhǔn)確性。由于串聯(lián)質(zhì)譜 (ms/ms) 對(duì)目標(biāo)分析物具有低檢測(cè)限 (lod)（高靈敏度）和高選擇性，因此常被用于葡萄酒成分的目標(biāo)分析。本應(yīng)用簡(jiǎn)報(bào)將介紹一種已發(fā)布的方法，使用 hs-spme 和穩(wěn)定的同位素內(nèi)標(biāo)在 agilent 7890a 氣相色譜儀和 agilent 7000b 三重四極桿氣質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)上對(duì)鹵代苯甲醚進(jìn)行快速、準(zhǔn)確且高重現(xiàn)性的ms/ms 分析。最終得到的 tca、teca、pca 和 tba 的檢測(cè)限和定量限均 ≤ 1 ng/l [1]。
實(shí)驗(yàn)部分標(biāo)準(zhǔn)品和試劑按照現(xiàn)有文獻(xiàn)所述 [1]，對(duì)鹵代苯甲醚標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行采購(gòu)并制備儲(chǔ)備液。同時(shí)還按照現(xiàn)有文獻(xiàn)準(zhǔn)備了模擬葡萄酒，用于進(jìn)行初步評(píng)估和校準(zhǔn)樣品的制備。從當(dāng)?shù)刭?gòu)得 5 種市售葡萄酒（2 種紅葡萄酒和 3 種白葡萄酒），用于回收實(shí)驗(yàn)。另外，還從當(dāng)?shù)貦z測(cè)實(shí)驗(yàn)室獲得了 5 種消費(fèi)者投訴有發(fā)霉氣味的受污染葡萄酒 [1]。
儀器利用 agilent 7890a 氣相色譜儀與 agilent 7000b 三重四極桿氣質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)相結(jié)合，并在氣相色譜儀的進(jìn)樣口處安裝 spme 進(jìn)樣襯管，進(jìn)行方法開(kāi)發(fā)。將一臺(tái) gerstel mps2 自動(dòng)進(jìn)樣器安裝在7890a 氣相色譜儀上便于進(jìn)行頂空萃取。表 1 列出了 gc/ms/ms儀器運(yùn)行條件。
受污染葡萄酒分析對(duì)消費(fèi)者投訴的受污染葡萄酒進(jìn)行分析，結(jié)果表明 tca 是檢測(cè)到的最主要的鹵代苯甲醚，其濃度水平接近或者超過(guò)報(bào)告的感覺(jué)閾值（表 5，圖 1）。其他種類(lèi)的鹵代苯甲醚未被檢出，或者檢出濃度比 tca 低 10 倍左右。
結(jié)論使用 hs-hpme 和 agilent 7000b 三重四極桿質(zhì)譜開(kāi)發(fā)了一種能快速、高通量分析葡萄酒中 tca、teca、pca 和 tba 的方法。tca、teca 和 pca 的 lod 和 loq 均低于 1 ng/l，tba 的 lod和 loq ≤ 1 ng/l。這些濃度均低于報(bào)告的感覺(jué)閾值，這對(duì)于葡萄酒生產(chǎn)的全程監(jiān)測(cè)具有重要作用，可確保生產(chǎn)和儲(chǔ)存過(guò)程中不會(huì)引入污染源導(dǎo)致葡萄酒產(chǎn)生霉味。方法優(yōu)化后，hs-spme 的萃取時(shí)間共計(jì) 15 min，其中包括 5 min 的預(yù)攪拌時(shí)間。氣相色譜分析時(shí)間為 11 min。
關(guān)鍵詞：氣相色譜儀 色譜儀