pcr由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：
1、模板dna的變性：模板dna經(jīng)加熱至94℃左右一定時(shí)間后，使模板dna雙鏈或經(jīng)pcr擴(kuò)增形成的雙鏈dna解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)做準(zhǔn)備；
2、模板dna與引物的退火(復(fù)性)：模板dna經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板dna單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合；
3、引物的延伸：dna模板--引物結(jié)合物在taq酶的作用下，以dntp為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板dna 鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈。
重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過程，就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需2～4分鐘， 2～3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬倍。