dna提取技術(shù)服務(wù)是一種使用破壁酶(lyticase)消化去除酵母細胞壁，然后采用一種新型的酵母質(zhì)粒純化柱實現(xiàn)從酵母細胞中進行小量質(zhì)?？焖俪樘岬脑噭┖?。
dna提取技術(shù)服務(wù)純化柱可以結(jié)合的質(zhì)粒量的上限約為20微克。質(zhì)粒dna的產(chǎn)量依賴于酵母攜帶質(zhì)粒的拷貝數(shù)，酵母菌株以及生長條件。通常酵母質(zhì)粒的拷貝數(shù)較低，1.5-5ml培養(yǎng)過夜的酵母抽提獲得的質(zhì)粒dna量約為1-3微克左右。高拷貝酵母質(zhì)粒抽提時的得率會大大提高。抽提所得質(zhì)粒的量與酵母培養(yǎng)濃度、質(zhì)粒拷貝數(shù)、酵母品系等因素有關(guān)。
dna提取技術(shù)服務(wù)本實驗方法的基本原理是，在高鹽狀態(tài)下，硅膠膜專一性地吸附dna；而在低鹽或水溶液狀態(tài)下，dna被洗脫下來。此法簡便快捷，可在30分鐘內(nèi)同時提純二十多個樣品。從3～5ml培養(yǎng)過夜的含高拷貝質(zhì)粒的菌液中可以獲得10～20μg高純度的質(zhì)粒dna，用于酶切、轉(zhuǎn)化、dna自動測序和手工測序等。
1、無需酚氯仿抽提，無需酒精沉淀，12個樣品只需約1-1.5小時即可完成。
2、試劑盒提供了破壁酶(lyticase)，酵母收集后，加入lyticase消化去除細胞壁，接著采用傳3統(tǒng)堿裂法裂解細胞，然后將獲得的上清液轉(zhuǎn)移至結(jié)合柱結(jié)合dna，經(jīng)過離心快速洗滌，最后用洗脫液洗脫出酵母質(zhì)粒dna。
3、由于采用了高濃度的破壁酶，無需再使用玻璃珠，可以避免因為玻璃珠的機械作用帶來的酵母基因組dna污染。