1．酶標抗抗體工作濃度的選擇
（1）用100ng/ml人igg進行包被，洗滌。
（2）將酶標抗人igg用稀釋液作一系列稀釋后分別加入已包被的孔中，保溫、洗滌。
（3）加底物顯色。加酸終止反應后，讀取吸亮度（a），繪制曲線如圖15-10。讀取a值在1.0時的酶標抗體稀釋度，作為酶標抗體的工作濃度。該酶標抗人igg的工作濃度應為1/1600。
2．棋盤滴定法選擇包被抗原工作濃度
（1）用包被液將抗原作一系列稀釋后進行包被，洗滌。
（2）將強陽性參考血清、弱陽性參考血清和陰性參考血清用稀釋液作1:100稀釋，加樣，保溫，洗滌。
（3）加按工作濃度稀釋的酶標抗人igg抗體，保溫，洗滌。
（4）加底物顯色。加酸終止反應后讀取a值。
（5）選擇強陽性參考血清的a值為0.8左右、陰性參考血清的a值小于0.1的包被抗的的稀釋度作為工作濃度。表15-1為本例的測定結果，表中數字為a值。從表中可見1:200為zui舒適的工作濃度。