hplc 柱前衍生法分析 b1
（aft）對(duì)有機(jī)體具有致突、致癌、致畸性，被列為可能的人體致癌物質(zhì)。 在多種人類(lèi)食物中被發(fā)現(xiàn)，如玉米、堅(jiān)果、花生等等，以 b1、b2、g1、g2 的形式存在。aftb1 在動(dòng)物體內(nèi)可轉(zhuǎn)變成兩 種主要代謝產(chǎn)物- aftm1 和 aftq ,前者的毒 性和致癌性與aftb1相近,主要存在于動(dòng)物 的尿和乳汁中。
可使用正相和反相液相色譜法分離，反相色譜法操作較容易、流動(dòng)相毒性也較低，被廣泛采用。使用反相液相色譜檢測(cè)時(shí)，可通過(guò)柱前衍生法或柱后衍生法，提高aftb1 、aftg1的檢 測(cè)靈敏度 ，使之與 aftb2、aftg2 在相近水平下檢測(cè)。柱前衍生法柱前衍生，hplc 檢測(cè) b1。該方法可用于 4 種 b1、b2、g1、g2 同時(shí)檢測(cè)，也可用于 aftm1 檢測(cè)。
樣品前處理
取 50μl b1 標(biāo)樣溶 液 (10ng/ml，溶劑溶液(98:2 v/v))，混勻1min，室溫下放置10min，氮?dú)獯蹈?，用乙腈水溶?乙腈/水 85：15 v/v) 50μl重新溶 解，混勻30s，經(jīng)0.45μm濾膜過(guò)濾，供液相色譜儀檢測(cè)用。
■ lc 分析條件
儀器：shimadzu lc-20a 液相色譜系統(tǒng)（含 lc-20at 二元泵、cto-20a 柱溫箱，rf-10axl熒光檢測(cè)器，lcsolution 色譜工作站）
色譜分析條件
流動(dòng)相：甲醇:乙腈:水=1:3:6
流速 ：1.0ml/min
色譜柱：shim-pack gvp-ods (4.6mm*10mm)；
shim-pack vp-ods (4.6mm*150mm,5μm) 激發(fā)波長(zhǎng) 365nm
發(fā)射波長(zhǎng) 425nm 柱溫：40℃ 進(jìn)樣量：10μl
■ 分析結(jié)果
b1（aftb1）標(biāo)樣色譜圖及分析結(jié)果
表 1 b1 分析結(jié)果
化合物
標(biāo)樣濃度
(ng/ml)
保留時(shí)間
(min)
峰面積
峰高
aftb1
衍生
10
3.368
329246
37098
aftb1
未衍生
10
6.721
12685
1024
■ 結(jié)論
三柱前衍生法可用于 aftb1 檢測(cè)，增強(qiáng)其熒光強(qiáng)度，提高檢測(cè)靈敏度。通過(guò)以上實(shí)驗(yàn)檢測(cè) aftb1 標(biāo)樣（10ng/ml），未經(jīng)衍生標(biāo)液的信噪比為 42，衍生后信噪比提高至s/n=1434