色譜柱能否用純水沖洗?沖洗后會有什么樣的影

發(fā)布時間:2024-03-14
用純水短時間內(nèi)沖洗色譜柱,通常不會對色譜柱造成較大的損傷,但如果長時間用水沖洗色譜柱則可能引起固定相流失和相塌陷現(xiàn)象,所以若非必要請盡量避免用純水沖洗色譜柱,建議在水中加入一定
量的甲醇或乙腈進行沖洗,通常水的含量<90%不會對色譜柱造成任何影響。
原因分析:
首先,由于目前所用的色譜柱大多以硅膠為基質,硅膠的溶解特點是在純水中的溶解度比在含有一
定濃度有機溶劑的流動相中要大得多,所以長時間的用純水沖洗會導致固定相的流失,引起柱效下降。
其次,對于常規(guī)的 c18 柱而言,由于c18 長鏈與水是不互溶的,c18 長鏈之間的相互作用力大于
c18 與水分子的作用力,長時間的用水沖洗,使得c18 長鏈之間相互靠近,水流的沖刷,導致相互聯(lián)結
的c18 長鏈倒伏在硅膠基質的表面,對疏水性物質的保留能力下降,即相塌陷。針對用純水沖洗容易出
現(xiàn)相塌陷的現(xiàn)象,有些廠家推出了純水柱(如我公司的ultimatetm aq-c18 柱),這種純水柱可以用純
水作流動相而不會產(chǎn)生相塌陷,這對只溶于純水的樣品的分析提供了一個很好的選擇。
第三,如使用過含緩沖鹽的流動相的色譜柱,用純水沖洗,并一定能將緩沖鹽*洗去。因為,由
于緩沖鹽難溶于有機溶劑,c18 反相柱中用的填料是在硅膠表面上接上許許多多的c18 長鏈,相當于一
個疏水的有機相,而硅膠基體被有機物質包裹著,所以用純緩沖鹽水溶液做流動相時也許緩沖鹽不容易
到達硅膠基質,不至損害基體。但所用的流動相通常會含一部分有機溶劑,而且這些有機溶劑與c18
長鏈是互溶的,因此有機溶劑的加入增強了流動相滲入硅膠基質的能力,能使部分緩沖鹽達到硅膠基質。
同樣的道理,用純水沖洗只能洗掉表面的緩沖鹽,而滲入深處的緩沖鹽則仍然殘留在那里。所以在
水中加入部分有機溶劑進行沖洗,一般的c18 柱通常用含水20%~90%都可以,含水的比例要視分析
時使用的流動相來定,原則上,用于沖洗的流動相中水的比例應該等于或高于(緩沖鹽用后清洗的情況,
推薦使用“等于”)分析時所用流動相中水的比例。
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