akta蛋白純化系統(tǒng)的一般操作：
1、開機(jī)
按位于底部平臺(tái)前左側(cè)的on/off 按鈕，打開色譜系統(tǒng)，然后打開電腦電源。待儀器自檢完畢（cu950上面的3個(gè)指示燈*點(diǎn)亮并不閃爍）。雙擊桌面上unicorn圖標(biāo)，進(jìn)入操作界面。unicorn的操作界面分為四個(gè)窗口（fig 3）
fig 3、unicorn的操作界面
2、準(zhǔn)備工作溶液和樣品
所有的工作溶液和樣品需要經(jīng)過0.45μm的濾膜過濾，樣品也可高速離心后取上清備用。當(dāng)緩沖液中含有有機(jī)溶劑（如乙腈、甲醇），需在使用前用低頻超聲脫氣10min。
3、清洗及管道準(zhǔn)備
首先將a泵的進(jìn)液管道（a1）放入緩沖液或平衡液中，將b泵的進(jìn)液管道(b1)放入高鹽溶液中，在system control窗口點(diǎn)擊工具欄內(nèi)的manual，選擇 pump→pump wash explorer，選中a1,b1管道為on， execute。泵清洗將自動(dòng)結(jié)束。(fig 4)
fig 4、akta explorer的泵清洗操作
4、安裝層析柱
在manual里選擇pump→flow rate，輸入一定的低流速（fig 5），insert；選擇alarm&mon→alarm pressure，設(shè)置high alarm（輸入填料或?qū)游鲋哪褪軌毫?，以較低者為設(shè)置值，具體可在填料說明書或?qū)游鲋f明書中查到），insert，execute（fig 6） 。待injectionvalve的1號(hào)位管道流出水后接入柱子的柱頭，稍微擰緊后將柱下端的堵頭卸掉接入管道連上紫外流動(dòng)池。
fig 5、akta explorer的流速設(shè)定操作
fig 6、akta explorer的限壓設(shè)定操作
5、開始純化：
1）在柱子平衡好之后（電導(dǎo)，ph的數(shù)值和變化趨勢(shì)穩(wěn)定）即開始上樣了。此時(shí)應(yīng)將紫外調(diào)零（fig 7），選擇alarm&mon→autozero，exectue。
fig 7、akta explorer的紫外調(diào)零操作
2）具體上樣方式：akta系統(tǒng)的上樣方式比較靈活，可以根據(jù)具體樣品的條件進(jìn)行上樣，包括用樣品環(huán)上樣、用系統(tǒng)泵上樣、用樣品泵上樣等，這里以用系統(tǒng)泵上樣為例簡(jiǎn)單介紹上樣過程。點(diǎn)擊pause，將a1放入樣品中，點(diǎn)擊countine，待樣品上完后，再將a1放入到平衡液中繼續(xù)清洗柱子。
3）洗脫：上樣后用緩沖液盡量將穿透峰洗回基線。在manual里選擇pump→gradient，
按照自己的工藝選擇targetb（100％）和length（10cv）（fig 8）。
fig 8、akta explorer的洗脫條件設(shè)定操作
4）設(shè)定收集：選擇frac→fractionation_900,輸入每管收集體積，exectue（fig 9）。結(jié)束固定體積收集選擇frac→fractionation_stop_900，exectue（fig 10）
fig 9、akta explorer的組分收集設(shè)定操作
fig 10、akta explorer的組分收集停止設(shè)定操作
5）清洗泵及卸下層析柱：
將a1和b1入口放入純水中，啟動(dòng)pump wash purifier功能沖洗a泵和b泵及整個(gè)管路。然后再將a1和b1入口放入20％乙醇中，同樣操作將乙醇沖滿整個(gè)管路保存。再給柱子一個(gè)慢流速，設(shè)置系統(tǒng)保護(hù)壓力，然后先拆柱子的下端，正在滴水的時(shí)候?qū)⒍骂^擰上，再拆柱子的上端，再擰上上端的堵頭。整個(gè)過程中應(yīng)防止氣泡進(jìn)入。
6）關(guān)閉電源：
從軟件控制系統(tǒng)的開始一個(gè)窗口unicorn manager點(diǎn)擊退出，其他窗口不能單獨(dú)關(guān)閉。然后關(guān)閉akta主機(jī)電源，關(guān)閉電腦電源。
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