70年代以來科研院所在蘭科植物中采用生物工程技術繁殖蘭花有過報道,其效果是傳統(tǒng)地方法無法和它媲美的,但由于種種原因此項先進的技術尚未得到推
廣。筆者帶著在家庭環(huán)境里能否開展此項工作這個問題經兩年的嘗試,已獲得小批量的春蘭試管苗,現將具體做法介紹于后供蘭友們參考。
一、建立小型家庭組織培養(yǎng)室,自制設備簡易土法上馬。眾所周知該項工作要在無菌條件下進行。為此,研制密封良好的玻璃接種箱、凈化空氣裝置,采取種種技術措施后轉瓶污染率大大地下降,據統(tǒng)計得知1994.6.26至1994.8.26日污染率為44.8%,改用酒精噴霧降塵后1994.10.4到1994.11.26成功率上升為92%,這就給篩選最佳培養(yǎng)基配方贏得了時間,奠定了良好的基礎。
二、在家庭環(huán)境里如何才能做到無菌操作呢?筆者著重從以下幾個方面入手。
1.所有接觸培養(yǎng)基的器皿能耐高溫的用干熱法處理,對不耐高溫的用具采廠化學方法滅菌消毒。
2.為解決接種時需在火焰上進行的問題增添了一只300w的電爐,但因溫度高易灼壞外植體,故又加設了通。風降溫的設施。
3.為了減少刀具的第二次在環(huán)境中污染的問題,高溫消毒后按放在一端封閉的簡內,同時不斷鼓入凈化的空氣加以冷卻確保外植體安然無恙的進入營養(yǎng)基瓶中。
4.所有進入箱內的物品均需酒精消毒后才放進,凡是帶菌者不許入箱,箱體消毒程序是酒精噴霧天紫外線消毒,并定期用甲醛加高錳酸進行熏蒸……
三、選用適宜的培養(yǎng)基配方。誘導——分化——生根均采用m·s基加茶乙酸、細胞分裂素。但不同的生長階段還需做成分上的調整,特別是生根時由于蘭生根較其他品種花卉難些故采用高濃度的naa浸泡數秒的做法,效果良好。
四、外植體的采取、消毒。外植體以長根的幼苗,隨采隨接種最好,成活率較高,外植體消毒筆者采取o.1升汞十1%。濃鹽酸多次消毒的辦法殺菌效果更佳。
五、培養(yǎng)環(huán)境。光照1000~2ooolux,1o~16小時,培養(yǎng)溫度26℃士2下生長,空氣濕度應控制在較低的水平,否則極易再一次污染。
幾點體會:
一、在家庭中建立小型組培室是可行的,它的投資少,筆者從籌備到設備進行試驗只花去數百元,該試驗設備也可開展其他品種如木本、藥用植物等的研究工作。
二、無菌操作必須從思想上重視,操作上謹慎才是。否則損兵折將,后果不堪設想。
三、目前因手下無實體顯微鏡,只能做以芽生芽的試驗,擬采取一些措施如分期切制樣品、液體加旋轉床的方案,是取得大批量類原球莖的一種途徑,其繁殖速度會大大地有所突破。