大鼠elisa檢測試劑盒操作程序的幾點

發(fā)布時間:2024-03-07
大鼠elisa檢測試劑盒?操作程序:
1. 棄去液體,甩干,每孔加滿稀釋后洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。如此重復(fù)5次,拍干。
2. 每孔先加入顯色劑a50μl,再加入顯色劑b50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。。
3. 取出酶標板,每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
4.測定:以空白孔調(diào)零,在450nm波長下測量各孔的吸光度值(od值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
5.根據(jù)大鼠elisa檢測試劑盒的濃度及對應(yīng)的od值計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣品的od值在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度。也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。應(yīng)記住由于樣品稀釋了的,其實際濃度應(yīng)該乘以總稀釋倍數(shù)。
大鼠elisa檢測試劑盒?原理:
采用競爭法測定金黃地鼠氧化低密度脂蛋白oxldl水平。用金黃地鼠氧化低密度脂蛋白oxldl抗原包被微孔板,制成固相載體,實驗時依次在微孔板中加入標本及標準品,并加入hrp標記的oxldl抗體,標本及標準品中的抗體和一定量的酶標抗體競爭與固相抗原結(jié)合。反復(fù)洗滌后加底物tmb顯色。tmb在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化為藍色,再用硫酸終止反應(yīng),轉(zhuǎn)變成黃色。標本中抗體量越多,結(jié)合在固相上的酶標抗體愈少,顏色越淺。顏色的深淺和樣品中的oxldl含量呈負相關(guān)。采用酶標儀在450nm波長測定吸光度(od值),根據(jù)標準曲線,計算測試樣品中oxldl濃度。
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