目前常用的幾種tszelisa試劑盒方法有：測定抗體的間接法，測定抗原的雙抗體夾心法和測定抗原的競爭法等。本實(shí)驗(yàn)采用間接法測定單克隆抗體效價。其主要過程為：首先將已知定量抗原吸附在聚苯乙烯微量反應(yīng)板的凹孔內(nèi)，加待測抗體，保溫后洗滌以除去未結(jié)合的雜蛋白質(zhì)，加酶標(biāo)抗抗體，保溫后洗滌，加底物保溫30分鐘后，加酸或堿終止酶促反應(yīng)，用目測或光電。
三、操作步驟
①抗原包被：兔抗人igg elisa試劑盒作為抗原，用包被液l：8000稀釋，100μl/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中。4℃放置過夜。
②洗滌：次日傾去凹孔內(nèi)的液體，洗滌液洗3次。
③封閉：加l00μl/孔封閉液，室溫放置0.5h.
④洗滌：用洗滌液洗3次。
⑤加待測樣品(一抗)：將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清在另-塊板上用pbs 連續(xù)稀釋(按照1：2或1：10)，100μl /孔加到 已包被的板上，每個樣品平行做兩份，pbs 或空白培養(yǎng)基作為陰性對照，已知樣品作為陽性對照。加蓋37℃恒溫箱溫育 1~2h。
⑥洗滌：用洗滌液洗3次。
⑦加酶標(biāo)抗抗體：兔抗鼠igg-hrp，用封閉液l ：8000稀釋，100μl／孔，加蓋37℃恒溫箱溫育1h。
⑧洗滌：用洗滌液洗5次，蒸餾水洗2次。
⑨顯色：加新鮮配制的底物溶液100μl/孔，室溫暗處放置5～30min，顯示藍(lán)色。
⑩終止反應(yīng)、比色：加50μl/孔終止液。tszelisa試劑盒顏色變黃；用酶標(biāo)儀測定450nm 處各孔的吸光值，陽性反應(yīng)的大稀釋度為待測 樣品的效價。
4-吡啶基硫脲 164670-44-4 號： 4-pyridylthiourea 英文名稱：
4-吡啶基乙酸鹽酸鹽, 98+% 號： na 英文名稱：
4-吡啶甲胺 3731-53-1 號： 4-pyridinemethaneamine 英文名稱：
4-吡啶硼酸(含有數(shù)量不等的酸酐) 1692-15-5 號： pyridine-4-boronic acid 英文名稱：
4-丙烯酰嗎啉 97％ 5117/12/4 號： 4-acryloylmorpholine 英文名稱：
4-差向脫水四環(huán)素 4465-65-0 號： 4-epianhydrotetracycline hydrochloride 英文名稱：
4-碘苯胺;對碘苯胺;對氨基碘苯;1-氨基-4-碘苯 540-37-4 號： 4-iodoaniline;p-aminoiodobenzene; 英文名稱：
4-碘苯甲酸;對碘苯甲酸 619-58-9 號： 4-iodobenzoic acid 英文名稱：
tszelisa試劑盒