通過優(yōu)化影響茶樹issr．pcr的主要參數(shù)，確立了適用于茶樹的issr反應(yīng)體系和擴(kuò)增條件。結(jié)果表明在20μl反應(yīng)體系中，模板dna、引物、mg^++、dntp和taqdna聚合酶五種主要成分的最適濃度分別為10ng、150nmol／l、1．5mmol／l、150gmol／l、0．5u。在擴(kuò)增過程中，引物的適宜退火溫度比其tm值平均高4．5℃，擴(kuò)增出足量產(chǎn)物至少需要30個熱循環(huán)。利用該優(yōu)化反應(yīng)體系和擴(kuò)增條件，對13份不同茶樹種質(zhì)資源進(jìn)行issr-pcr擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物的多態(tài)性為77．6％。引物tri18構(gòu)建的issr指紋圖譜，可以區(qū)分13份茶樹資源中的12份，分辨率達(dá)92．3％。完成機(jī)構(gòu)：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所，農(nóng)業(yè)部茶葉化學(xué)工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，浙江杭州310008