一、操作步驟：
1)首先對流動相進(jìn)行過濾，根據(jù)需要選擇不同的濾膜，一般為有機系和水系，常用的孔徑為0.20um和0.45um。
2)對抽濾后的流動相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。
3)正常情況下，儀器首先用甲醇沖洗10-20分鐘，然后再進(jìn)入測試用流動相(如流動相為緩沖試劑，則要二次重蒸水沖洗10-20分鐘，直至色譜柱中有機相沖凈為止) 。
4)一般情況下，流動相沖洗20-30分鐘后，儀器方可穩(wěn)定，重要的是儀器基線走后，方可進(jìn)樣測試。
5)同時進(jìn)兩針標(biāo)樣，將其結(jié)果相比較，其結(jié)果的比值在0.98-1.02之間后，就可以正式進(jìn)行樣品的測試了。
6)樣品測試結(jié)束后，就要進(jìn)行色譜儀及色譜柱的清洗和維護(hù)。如流動相為緩沖試劑，同樣也要用重蒸水清洗10-20分鐘，方可用有機相進(jìn)行保護(hù)，否則，有損色譜柱。
7)關(guān)機時，先關(guān)計算機，再關(guān)液相色譜。
8)填寫登記本，由負(fù)責(zé)人簽字。
二、注意事項：
1)流動相均需色譜純度，水用20m的去離子水。脫氣后的流動相要小心振動盡量不引起氣泡。
2)柱子是非常脆弱的，做的方法，先不要讓液體過柱子。
3)所有過柱子的液體均需嚴(yán)格的過濾。
4)壓力不能太大，建議不要超過150kgf/cm2 .
5).因為緩沖試劑遇有機溶劑，會結(jié)晶，有損色譜柱，所以，每次由有機相變流動相或流動相變有機相均需用蒸餾水清潔。
潮濕環(huán)境中如何維護(hù)液相色譜儀
操作人員*關(guān)心的是分析結(jié)果，而檢測器是hplc的眼睛。由于很多時候天氣潮濕，很容易使檢測器精密的光學(xué)部件性能受到影響，導(dǎo)致靈敏度下降或波長檢驗通不過，更嚴(yán)重者：燈電路板、預(yù)放大板及cpu板同時被短路擊壞。而這類情況在干燥的北方地區(qū)則比較少。由此可見，潮濕氣候?qū)x器損害之大。
在多雨季節(jié)到來之前，勿請用戶將儀器調(diào)整放置在通風(fēng)條件好，濕度低(<70%)的實驗室內(nèi)。同時，給實驗室配備去濕機、空調(diào)及通風(fēng)裝置。表面上看，雖然增加了支出，但您的實際回報將大大超出您的支出。