在原代細胞中能檢測到epcam的表達, 并且被認(rèn)為是多能性人類胚胎干細胞的表面標(biāo)記物。越來越多的證據(jù)表明, epcam可能是肝癌干細胞潛在的標(biāo)志物, 現(xiàn)有的研究已證明了以下幾點:
(1)已知的肝干細胞標(biāo)志物在epcam +細胞中高表達, 而成熟肝細胞標(biāo)志物在epcam–細胞中的表達明顯增高; (2)與epcam–細胞相比, ep-cam+細胞有更強的克隆形成能力; (3)epcam+細胞包含一個多潛能的細胞群, 可分化為epcam+細胞
和epcam–細胞; (4)nod/scid小鼠的體內(nèi)致瘤實驗表明, epcam+細胞可有效形成腫瘤, 而epcam–細胞不能; (5)體外侵襲實驗表明, epcam+的肝癌細胞具有比epcam–細胞更強的侵襲性; (6)epcam+細胞亞群比epcam–細胞亞群高表達干細胞轉(zhuǎn)錄
因子nanog、sox2和oct4, 并且用分化誘導(dǎo)劑處理epcam高表達的肝癌細胞后, 隨著epcam表達的降低, 細胞分化因子albumin、ck8和ck18的表達逐漸升高。由此可見, epcam+的肝癌細胞是肝癌干細胞的亞群。進一步的研究表明,wnt/β-catenin信號通路在胚胎干細胞的維持過程中發(fā)揮了重要作用, 在epcam+的hcc中信號通路wnt/β-catenin被激活, 并且epcam是wnt/β-catenin信號通路直接的轉(zhuǎn)錄靶向基因。此外, 體外實驗表明, epcam+肝癌細胞比epcam–細胞對β-catenin抑制劑更敏感。在epcam+肝癌細胞中, wnt/β-catenin信號通路處于激活狀態(tài)。kimura等認(rèn)為, 相對于epcam–細胞, epcam+細胞有更強的致瘤性, 這可能是由于wnt/β-catenin信號通路的參與, 并推測epcam+ 和epcam–兩個亞群細胞生物學(xué)特性差異的原因是二
者參與了不同的信號通路, 而不僅僅是細胞表面抗原epcam表達的差異。
本實驗從五種肝癌細胞系中選出epcam高表達的bel-7404細胞作為分選細胞, 以epcam為分選標(biāo)記物, 利用流式細胞儀成功分選出較高純度的epcam+細胞。隨后進行了一系列體外實驗, 包括cck-8細胞增殖實驗、順鉑作用下的耐藥實驗和平板克隆實驗, 結(jié)果表明, 與未分選的bel-7404細胞和epcam–細胞相比, epcam+細胞具有更強的體外增殖能力, 對化療藥物順鉑表現(xiàn)出了更強的抗藥性和*的克隆形成能力。
綜上所述, 本研究的結(jié)果表明, cd90和epcam不在同一種肝癌細胞系中表達, 且cd90高表達的肝癌細胞系sk-hep-1與表達epcam的bel-7404原代細胞呈現(xiàn)不同的形態(tài)特征。從肝癌細胞系bel-7404中分選的epcam+細胞具有腫瘤干細胞的特性: 自我更新和增殖能力、耐藥性以及更強的克隆形成能力。
monoglycerides 68990-53-4 125mg 單甘酯標(biāo)準(zhǔn)品
monosodium glutamate (as) 142-47-2 1g 谷氨酸一鈉標(biāo)準(zhǔn)品
monostearyl maleate 2424-62-6 100mg 馬來酸單十八酯標(biāo)準(zhǔn)品
monukast sodium 151767-02-1 150mg 孟魯司特鈉標(biāo)準(zhǔn)品
moran tartrate 26155-31-7 100mg 酒石酸莫侖太爾標(biāo)準(zhǔn)品
moricizine hydrochloride 29560-58-5 250mg 鹽酸莫雷西嗪標(biāo)準(zhǔn)品
morphine monohydrate cii (as) 6009-81-0 50mg 一水合嗎啡標(biāo)準(zhǔn)品
moxifloxacin hydrochloride 186826-86-8 200mg 鹽酸莫西沙星標(biāo)準(zhǔn)品
原代細胞