產(chǎn)品型號(hào):13406.13407.13408.13409
fitc-c6(c3)-devd-fmk能提供簡便靈敏的方法對(duì)活細(xì)胞中對(duì)的caspase進(jìn)行檢測(cè)。fitc-c6(c3)-devd-fmk在凋亡細(xì)胞中具有通透性,性和不可逆結(jié)合的caspase-3的特點(diǎn),是帶有fitc熒光標(biāo)記的caspase-3抑制劑。fitc標(biāo)記能直接通過熒光顯微鏡,流式細(xì)胞儀或者熒光酶標(biāo)儀測(cè)定的caspase。百螢生物是aat bioquest的中國代理商,為您提供優(yōu)質(zhì)的胱天蛋白酶caspase 3/7熒光底物 fitc-c6(c3)-devd-fmk 綠。
實(shí)驗(yàn)方案
操作方法
以下協(xié)議僅提供指導(dǎo),應(yīng)根據(jù)您的特定需求進(jìn)行修改。
使用amc,afc,pna,r110和prored底物的常規(guī)解決方案胱天蛋白酶測(cè)定
1.在dmso中準(zhǔn)備10 mm的儲(chǔ)備溶液。
2.如下準(zhǔn)備2x半胱天冬酶底物(50 µm)分析溶液:50 µl底物原液,100 µl dtt(1m),400 µl edta(100 mm),10 ml tris buffer(20 mm),ph = 7.4。
3.將等體積的半胱天冬酶標(biāo)準(zhǔn)品或樣品與2x半胱天冬酶底物測(cè)定溶液混合,并在室溫下孵育至少1小時(shí)。
4.使用熒光酶標(biāo)儀監(jiān)測(cè)熒光,或使用酶標(biāo)儀監(jiān)測(cè)吸光度。
使用細(xì)胞滲透性fmk caspase探針的細(xì)胞caspase測(cè)定
1.在dmso中準(zhǔn)備2-5 mm的儲(chǔ)備溶液。
2.根據(jù)需要處理細(xì)胞。
3.通過用20 mm hepes緩沖液(hhbs)在hanks中稀釋dmso儲(chǔ)備溶液(來自步驟2.1),制備2x滲透性半胱天冬酶底物(20 µm)分析溶液。
4.將等體積的處理過的細(xì)胞與2x半胱天冬酶底物測(cè)定溶液混合(來自步驟2.3),并在37°c,5%co2的培養(yǎng)箱中孵育細(xì)胞至少1小時(shí)。
5.用hhbs清洗細(xì)胞至少一次。
6.通過流式細(xì)胞儀,熒光顯微鏡或熒光酶標(biāo)儀監(jiān)測(cè)熒光強(qiáng)度。
使用細(xì)胞滲透性fmk caspase探針進(jìn)行細(xì)胞半胱天冬酶測(cè)定(僅適用于#13470-13476)
1.通過向小瓶中加入50 µl dmso制備250x儲(chǔ)備液。
2.根據(jù)需要處理細(xì)胞。
3.以1:250的比例將250 x dmso儲(chǔ)備溶液添加到細(xì)胞溶液中(例如2 µl至500 µl細(xì)胞),并將細(xì)胞在37°c,5%co2的培養(yǎng)箱中孵育1小時(shí)。
4.用hhbs清洗細(xì)胞至少一次。
5.通過流式細(xì)胞儀,熒光顯微鏡或熒光酶標(biāo)儀監(jiān)測(cè)熒光強(qiáng)度。
關(guān)鍵詞:培養(yǎng)箱 酶標(biāo)儀 流式細(xì)胞儀 熒光顯微鏡 熒光酶標(biāo)儀