細胞生長狀態(tài)受多種因素影響，在培養(yǎng)細胞時，我們知道溫度不能過高也不能過低，有些細胞培養(yǎng)前還需要包被培養(yǎng)瓶，但實驗過程中我們很容易忽略這些小因素，導致細胞負傷慘重。
這些小細節(jié)究竟如何影響的細胞狀態(tài)？在培養(yǎng)時我們又該如何避免？本期整理了影響細胞生長最chang見的五類因素，助您完mei避坑！
01細胞生長附著物
貼壁細胞在正常情況下都會貼壁，但某些細胞本身貼壁不牢或貼壁性差，而包被附著物能夠促進細胞的黏附，所以在培養(yǎng)一些特殊細胞時，需要對培養(yǎng)瓶/皿進行包被后使用。常用的基質有多聚賴氨酸（d型、l型）、明膠、膠原蛋白、細胞外基質混合物，培養(yǎng)時可根據(jù)需要自行選擇。
小貼士
細胞貼壁差時可使用基質包被培養(yǎng)瓶/皿。
02細胞之間的接觸程度
正常細胞（二倍體）存在貼壁接觸抑制，長滿后細胞生長停止，而腫瘤細胞等非正常細胞，接觸抑制作用較弱，可生長至較高的細胞密度，但某些細胞一旦長過，其損傷難以逆轉，所以培養(yǎng)細胞時不建議細胞密度太高。
小貼士
無論什么細胞，都不能長滿再傳代，一般細胞匯合度達到70-80%即可傳代。
03培養(yǎng)基ph值
大多數(shù)細胞系在ph7.4左右時生長最hao，而常規(guī)培養(yǎng)基的指示劑為酚紅，所以多數(shù)情況下，我們所見的培養(yǎng)基都呈紅色，但不同培養(yǎng)基的顏色會有差異，例如dmem比1640顏色深一點。在培養(yǎng)細胞時，也可以根據(jù)培養(yǎng)基的顏色判斷細胞狀態(tài)，如隨著細胞生長，ph值會變成黃色。
小貼士
培養(yǎng)時時刻關注培養(yǎng)基顏色變化，發(fā)現(xiàn)異常及時處理。
圖1.培養(yǎng)基ph值對應顏色
04氣相成分
大部分培養(yǎng)基適合于95%空氣5%co2，但有部分培養(yǎng)基例外，如l15培養(yǎng)基適合于100 %空氣，co2會導致培養(yǎng)液ph降低（培養(yǎng)液變黃），嚴重影響細胞生長；若需要用l15培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞，但沒有100 %空氣培養(yǎng)箱時，可以擰緊瓶蓋或換培養(yǎng)基（效果可能更好）培養(yǎng)。適用于co2環(huán)境的培養(yǎng)基需保持培養(yǎng)瓶透氣。
小貼士
培養(yǎng)細胞時注意參照說明書選擇培養(yǎng)基，并注意培養(yǎng)壞境。
05培養(yǎng)溫度
對于大部分人源細胞和溫血動物細胞系來講，比較適宜的培養(yǎng)溫度是37℃，因為這個溫度接近體溫，但為了安全可以再稍低一些，高于體溫的溫度要比低于體溫的溫度更易產生問題。對于鳥類細胞，由于其體溫較高，所以培養(yǎng)溫度可以設置為38.5℃左右。
小貼士
培養(yǎng)細胞時保持溫度穩(wěn)定，不要長時間敞開培養(yǎng)箱的門，并且不要將培養(yǎng)器皿大量重疊堆放在培養(yǎng)箱中，避免空氣不循環(huán)。
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