對于每天泡在實驗室的人來說,qpcr已是家常便飯。毫無疑問濃度高,純度好,片段完整,才是我們理想中的rna樣品。然而,rna總是嬌氣的存在!室溫或4度極易降解,提取的時候容易有污染物殘留。因此完整的rna質(zhì)控包含了三個方面:濃度質(zhì)控,純度質(zhì)控,片段完整性質(zhì)控。
如何把控rna質(zhì)量,繼續(xù)反轉(zhuǎn)錄呢?
有一款rna質(zhì)控的高手,既可以提供rna濃度質(zhì)控,也可以提供rna純度質(zhì)控,沒錯,就是美國denovix公司提供的ds-11fx超微量紫外/熒光全功能分光光度計,看上去酷酷的
rna純度質(zhì)控的標(biāo)準方法是超微量分光光度計(光吸收)法,通過監(jiān)控a260/230和a260/280的比值來判定rna的純度。通常a260/280的比值范圍在1.8-2.0之間,如果大于2.0則說明rna已經(jīng)降解,如果低于1.8則說明含有蛋白質(zhì)或其他雜質(zhì);而a260/230的比值如果小于2,則表明rna中含有酚類,鹽等雜質(zhì)。ds-11fx的微量光度計功能可以幫助科研人員來準確的判定rna樣品的純度。
下圖為rna紫外法檢測示意圖,a260/280和a260/230都不在正常的比值范圍,說明rna樣品純度很差,儀器會自動進行提示,兩個黃色小三角就是警示圖標(biāo)哦,點擊萌萌的黃色三角警示,儀器會顯示污染物的種類,夠智能吧,這就是ds-1有的smartqc功能
rna濃度質(zhì)控的標(biāo)準方法是熒光法,除非是純度很高的rna也可以采用紫外法。熒光法采用rna特異性染料,可以準確的測量rna濃度。ds-11fx不但提供rna濃度質(zhì)控,也可以提供dna和蛋白的濃度精確控制,功能超級強大哦。