增強(qiáng)型黃色熒光蛋白（eyfp）簡(jiǎn)介
在綠色熒光蛋白的晶體結(jié)構(gòu)研究中發(fā)現(xiàn)203位接近生色團(tuán)后，對(duì)黃色熒光蛋白家族的研究才開(kāi)始。將203位突變可以穩(wěn)定生色團(tuán)在激發(fā)狀態(tài)的偶極矩，這樣可以使激發(fā)光和發(fā)射光的波長(zhǎng)均增加20nm。并改造成增強(qiáng)黃色熒光蛋白（eyfp）。eyfp的亮度和發(fā)射光譜的有機(jī)結(jié)合使得這一熒光探針在熒光多色成像中得到很好的應(yīng)用。eyfp還可以與增強(qiáng)青色熒光蛋白（ecfp）或gfp2一起應(yīng)用到fret中。然而，黃色熒光蛋白也存在對(duì)酸性條件非常敏感，ph6.5時(shí)會(huì)失去近50%的熒光。eyfp對(duì)氯離子非常敏感，光漂白現(xiàn)象比綠色熒光蛋白還嚴(yán)重。
eyfp的產(chǎn)生主要依賴于對(duì)野生型gfp的發(fā)色團(tuán)周圍微環(huán)境的改造。相對(duì)于avgfp，最大的突變?cè)谟谌〈藅hr203。當(dāng)熒光蛋白折疊時(shí)，tyr203的酚基將會(huì)伸入到熒光蛋白內(nèi)部的空腔，并且與發(fā)色團(tuán)的酚基團(tuán)在空間上形成了π-π疊加相互作用。這種突變穩(wěn)定了發(fā)色團(tuán)的激發(fā)態(tài)偶極矩，從而使得gfp的吸收光譜和發(fā)射光譜整體向長(zhǎng)波方向平移約20 nm左右。另外gln69向lys的突變?cè)鰪?qiáng)了發(fā)色基的離子化，將發(fā)射波長(zhǎng)向長(zhǎng)波方向進(jìn)一步移動(dòng)了1-2 nm。
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以上資料來(lái)自小編msq,2023.09.27
以上文中提到的產(chǎn)品僅用于科研，不能用于人體及其他用途。