規(guī)格：100t/96s
產(chǎn)品內容：
提取液：液體100ml×2瓶，4℃保存。試劑一：粉劑×1瓶，常溫保存。
微量法
標準品：粉劑×1支，10mg單寧酸，4℃保存。臨用前加入1.175ml提取液溶解為5000nmol/ml的標準液。
產(chǎn)品說明：
單寧又稱植物多酚，是一類廣泛存在于植物體內的多元酚化合物。單寧可作為潛在的生物標記物；與蛋白質結合的能力又稱為收斂性或澀性。其收斂性是多種生理活性的基礎，如止血、抗腫瘤、抗衰老等生理活性，也是影響產(chǎn)品口感的因素之一。
根據(jù)光譜特性，單寧在275nm下有較強的紫外吸收，通過利用活性炭能夠特異吸附單寧的性質來檢測單寧含量。
自備實驗用品及儀器：
紫外分光光度計/酶標儀、離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔uv板和蒸餾水。
測定操作：
1、樣本處理：
將樣本烘干至恒重，粉碎，過40目篩之后，稱取約0.05g，加入1ml提取液，封口膜封口防止液體濺出，于70℃水浴提取30min，期間可搖晃數(shù)次。12000rpm，25℃，離心10min，取上清，用提取液定容至1ml，待測。
2、操作步驟：
（1）紫外分光光度計/酶標儀預熱30min，波長調至275nm。蒸餾水調零。
（2）將5000nmol/ml標準液用提取液稀釋為6.25、3.125、1.5625、0.78625、0.4、0.2nmol/ml標準溶液。
（3）加樣表：
試劑名稱
測定管
對照管
標準管
空白管
試劑一
大約5-7mg
-
-
大約5-7mg
蒸餾水
-
-
-
0.5ml
標準溶液
-
-
0.5ml
-
樣品
0.5ml
0.5ml
-
-
充分混勻震蕩5min，13000g 離心20min。取200µl上清液測定275nm下的吸光度，分別記為a測定管、a對照管、a標準管、a空白管，計算?a測定=a對照管-a測定管，a標準=a標準管-a空白管。
單寧含量計算：
1、標準曲線的繪制：
以標準溶液的濃度為x軸，以a標準為y軸，繪制標準曲線，得到方程y=kx+b，將?a測定帶入方程中得到x（nmol/ml）
2、單寧含量計算：
1.按蛋白濃度計算：
單寧含量（nmol/mg prot）=x×v提取÷(v提取×cpr) =x÷cpr。
2.按樣本鮮重計算：
單 寧 含量 （nmol/g 鮮 重 ）=x×v 提取÷w =x÷w。cpr： 樣品蛋白濃度，mg/ml（蛋白濃度需重新用pbs提取測定）；w：樣品質量，g；v提?。?br>提取液體積，2ml。
注意事項：
1、 當?a大于1.5時，建議將樣品上清液用提取液稀釋更大倍數(shù)后測量；?a過小時，建議減少稀釋倍數(shù)或增加樣品質量來測定。