bio-rad lynx rapid hrp antibody conjugation kit能夠使辣根過氧化物酶(hrp)快速標(biāo)記在抗體或蛋白質(zhì)上?？贵w標(biāo)記溶液中zhuan利試劑的激活能讓hrp定向共價(jià)結(jié)合在抗體上。該試劑盒可用于在接近中性的ph值的溶液環(huán)境中的抗體/蛋白質(zhì)標(biāo)記上hrp，并能保證100%抗體回收率的高結(jié)合效率。
試劑盒組分：
5 vials of 1mg lynx lyophilized hrp mix
1 vial lynx modifier reagent
1 vial lynx quencher reagent
推薦使用以下緩沖溶液準(zhǔn)備抗體:
10-50mm amine-free buffer(例如hepes、mes、mops和磷酸鹽)ph范圍6.5-8.5或者中等濃度的tris緩沖液(< 20mm)。如果可能，避免含有nucleophilic成分的緩沖液，如amines和thiols(如thiomersal/thimerosal))，因?yàn)樗鼈兛赡軙?huì)與標(biāo)記試劑發(fā)生反應(yīng)。edta和普通的非緩沖鹽和糖對(duì)結(jié)合效率影響很小。疊氮化na是hrp的不可逆抑制劑，避免引入疊氮化na。理想地用于標(biāo)記的抗體的量應(yīng)該對(duì)應(yīng)于抗體與hrp之間1∶4和1∶1的摩爾比?？紤]到分子量(160,000對(duì)40,000)，這意味著對(duì)于4mg的辣根過氧化物酶，需要加入1-4mg的抗體。為獲得最佳結(jié)果，抗體體積應(yīng)達(dá)到1ml，濃度范圍為0.5-5.0mg/ml。
標(biāo)記步驟：
1.向抗體樣品中每10μl抗體添加1μl的modifier reagent，并輕輕混合。
2.用移液管將混合的抗體-modifier reagent樣品直接移至lynx lyophilized hrp mix中，輕輕上下吹打兩次以重懸。
3.蓋好蓋子，然后在室溫(20-25℃)下孵育3小時(shí)，也可以孵育過夜。
4.孵育后，每10μl抗體添加1μl的quencher reagent。使用前靜置30分鐘。
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lnk004p
lynx rapid hrp antibody conjugation kit
5 conjugations for 4mg antibody
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