蛋白標(biāo)簽（protein tag）又稱為標(biāo)簽蛋白，是利用dna體外重組技術(shù)，將目的蛋白與其融合表達(dá)形成的一種多肽或蛋白。這種標(biāo)簽有助于目的蛋白的表達(dá)、檢測、示蹤和純化等操作。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步，研究人員已經(jīng)成功開發(fā)出了具有各種不同功能的蛋白標(biāo)簽。然而，由于不同的蛋白標(biāo)簽具有各自的特性，因此在質(zhì)粒構(gòu)建過程中常常會遇到多種問題。今天，我們將深入探討蛋白標(biāo)簽的各個方面。
蛋白標(biāo)簽類型
蛋白標(biāo)簽主要分為三類，適用于不同的應(yīng)用場景：表位標(biāo)簽、親和標(biāo)簽和熒光標(biāo)簽。
①表位標(biāo)簽往往是短肽序列，可用于免疫學(xué)應(yīng)用，如 western blot 和免疫共沉淀。常用的表位標(biāo)簽有his、flag、ha等。
②親和標(biāo)簽一般較長，可增加蛋白溶解度，廣泛應(yīng)用于重組蛋白的純化，如sumo、trx、mbp等。
③熒光標(biāo)簽可用于活細(xì)胞和死細(xì)胞檢測，常用的熒光蛋白包括綠色熒光蛋白（gfp）、橙色熒光蛋白（ofp）、紅色熒光蛋白（rfp）和黃色熒光蛋白（yfp）。它們被廣泛用于影像學(xué)研究，如細(xì)胞定位和共表達(dá)實驗。
蛋白標(biāo)簽在重組蛋白生產(chǎn)中有什么作用?
1、識別：給蛋白加標(biāo)簽使其易于識別，進(jìn)而快速鑒定感興趣的蛋白質(zhì)。
2、純化：利用標(biāo)簽蛋白對目的蛋白進(jìn)行純化。例如，his6是一種由六個組氨酸殘基組成的融合標(biāo)簽，可以插入目的蛋白的c末端或n末端。組氨酸殘基側(cè)鏈與固態(tài)的鎳有強烈的吸引力，這使得his6標(biāo)簽可用于固定化金屬螯合層析(imac)，從而對重組蛋白進(jìn)行分離純化。
3、定量：通過量化標(biāo)簽來確定目的蛋白的存在量。
4、定位：通過定位標(biāo)簽蛋白定位到目標(biāo)蛋白在細(xì)胞中的特定位置，進(jìn)而研究其生理功能、信號通路等。
5、跟蹤：在細(xì)胞、組織和生物體中，通過追蹤標(biāo)簽蛋白質(zhì)追蹤目的蛋白，以研究它們的表達(dá)、分布、代謝等生物學(xué)過程。
總之，蛋白標(biāo)簽在重組蛋白生產(chǎn)中扮演著重要的角色，它們不僅提高了生產(chǎn)效率，還為蛋白的檢測、純化和示蹤提供了便利。
常用的蛋白標(biāo)簽有：his-tag、flag-tag、ha-tag、myc-tag、sumo-tag、trx-tag、gst-tag……義翹神州不僅可提供重組蛋白表達(dá)定制服務(wù)，也可提供對應(yīng)標(biāo)簽抗體產(chǎn)品及融合蛋白標(biāo)簽切除常用工具酶，如ek蛋白酶、3c蛋白酶等。下圖是具體蛋白標(biāo)簽的序列和大小介紹，詳情可以關(guān)注：cn.sinobiological com/resource/protein-review/protein-tag