以山茶基因組dna為材料,測試山茶issr擴增的最適退火溫度,并采用單因素試驗,測試了模板dna量,mg^2+濃度,dntp濃度,bsa濃度,引物用量,taq酶用量等6個因素對山茶issr擴增的影響。結(jié)果顯示:山茶issr擴增的最適退火溫度為56.3℃;適宜的擴增體系為:10μl pcr反應(yīng)體積中,1×taq酶配套緩沖液(10 mmol·l^-1tris.hcl ph 9.0,50mmol·l^-1kcl,0.1%triton x-100),2 mmol·l^-1mgcl2,0.6 mmol·l^-14×dntp,2 mg·ml^-1bsa,16 ng模板dna,10 pmol引物,0.5 u taq酶。完成機構(gòu):[1]北京林業(yè)大學(xué)自然保護區(qū)學(xué)院,北京100083 [2]臺州學(xué)院生態(tài)研究所,浙江臨海317000 [3]臺州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院,浙江臨海317000