胎牛血清的保存方法：
需要*保存的胎牛血清必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí) 間切勿超過1個(gè)月。切勿將血清在 37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時(shí)血清中的有效成 分會被破壞，而影響血清質(zhì)量。如果一次無法用完一瓶,可 將40～45ml分裝于無菌50ml離心 管中。由于血清結(jié)冰時(shí)體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前，必須預(yù)留一 定體積 空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。
胎牛血清的使用方法：
1、瓶裝胎牛血清解凍需采用逐步解凍法：-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天，然后移入室溫,待全部溶解后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40～45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。
2、滅活處理：熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已*解凍的血清，加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分滅活，除非必須,一般不建議作此熱處理,因?yàn)闊崽幚頃斐裳宄恋砦镲@著增多,而且還會影響血清的質(zhì)量。補(bǔ)體參與反應(yīng)有:細(xì)胞毒作用, 平滑肌細(xì)胞收縮, 肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺, 增強(qiáng)吞噬作用, 促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化。
3、一般廠商提供的胎牛血清為無菌,無需再過濾除菌。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接過濾血清。
4、血清中的沉淀物絮狀物：主要是胎牛血清中的脂蛋白變性及解凍后胎牛血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量?？捎秒x心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理。 顯微鏡下小黑點(diǎn):經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象小黑點(diǎn),常誤認(rèn)為血清受污染。一般情況下,此小黑點(diǎn)不會影響細(xì)胞生長,但如果懷疑血清質(zhì)量,則應(yīng)立即停止使用,更換另一批號的血清。