1.制備細(xì)胞懸液：關(guān)于懸液培育的細(xì)胞，可直接進(jìn)行下面的過程2（計數(shù)與核算過程）。假如計數(shù)對象為貼壁生長的細(xì)胞，首先需將培育物按如下過程制備成細(xì)胞懸液。
①停止培育，將培育液吸出，用pbs洗培育物一次。
②給培育瓶內(nèi)參加1ml 0.25％*溶液，于37℃消化3～5min 。期間不斷在鏡下調(diào)查。當(dāng)細(xì)胞變圓挨近脫壁時，棄消化液。
③參加一定量的培育液（假如這些培育細(xì)胞不再有用，可加pbs），用吸管吹打，使細(xì)胞脫壁而制成細(xì)胞懸液。
2.計數(shù)與核算過程
①在細(xì)胞計數(shù)板*放置計數(shù)的蓋玻片。
②用玻璃虹吸管吸取細(xì)胞，讓虹吸管在蓋玻片上或下側(cè)的計數(shù)板凹蹧處流出懸液，至蓋玻片被液體充滿停止。
③置顯微鏡下計數(shù)四角大方格內(nèi)的細(xì)胞總數(shù)。關(guān)于壓線的細(xì)胞只計數(shù)在上線和左線者，關(guān)于細(xì)胞團(tuán)按單個細(xì)胞計數(shù)。
④按下式計數(shù)細(xì)胞懸液的密度：細(xì)胞密度＝（4個大格細(xì)胞總數(shù)/4）×104個/ml 。
二、注意事項：
①務(wù)必使渙散成單個細(xì)胞，取樣計數(shù)前，充分混勻細(xì)胞懸液。
②顯微鏡下計數(shù)時，遇到2個以上細(xì)胞組成的細(xì)胞團(tuán)，應(yīng)按單個細(xì)胞核算。假如細(xì)胞團(tuán)>10％，闡明細(xì)胞渙散不充分。
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