大鼠骨成型蛋白4elisa試劑盒原理:
本試劑盒采用雙位點(diǎn)夾心酶聯(lián)免疫吸附法(elisa),測定樣品中大鼠骨成型蛋白4的水平。向預(yù)先包被大鼠骨成型蛋白4抗體的酶標(biāo)孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本和hrp標(biāo)記的大鼠骨成型蛋白4抗體,經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的組分,然后再加入底物a、b,產(chǎn)生藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺與樣品中大鼠骨成型蛋白4的濃度呈正相關(guān)。
大鼠骨成型蛋白4elisa試劑盒注意事項:
1.血清標(biāo)本如是以無菌操作分離,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應(yīng)在-70℃以下。
2.在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3.吸取液體時速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,吸取的量不夠準(zhǔn)確。
4.樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶,如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。1.5吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。
5.液體全部加入酶標(biāo)孔后,將酶標(biāo)板放在桌子上平行輕輕搖晃30s,使液體充分混合均勻,也使其得到充分的反應(yīng)。
6.孵育時要使蓋板膜封好酶標(biāo)板,防止水分蒸發(fā),以防曲線不成線性。
7.實驗前30min將試劑盒中的所有試劑從冰箱取出,使試劑盒中的所有試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同,酶標(biāo)板只要取出所需量。
8.由于底物顯色劑對光及其敏感,因此要避光保存。
要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有類似過氧化物的活性,因此,在以hrp為標(biāo)記酶的elisa測定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的hrp底物反應(yīng)顯色
9.手工洗板時每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置15~30s,不要將一個酶標(biāo)孑l中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。
10.檢測吸光度前應(yīng)將酶標(biāo)儀打開,將其預(yù)熱30min以上。
11.底物為tmb,避免與皮膚相接觸。終止液為2tool的濃**具有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸皮膚。
12.孵育的時間應(yīng)該嚴(yán)格按照試劑盒說明書上的時間為準(zhǔn)。
13.要盡量做雙孔實驗,這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,又能反映出試劑盒的精密度。
14.冰凍保存的血清標(biāo)本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。標(biāo)本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機(jī)械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用,從而引起假陰性結(jié)果。此外,凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)注意,不要進(jìn)行劇烈振蕩,反復(fù)顛倒混勻即可。
15.對樣本的結(jié)果有疑問時需要使用其他檢測方法進(jìn)行驗證。
16.沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水。
17.標(biāo)本在保存中如出現(xiàn)細(xì)菌污染所致的混濁或絮狀物時,應(yīng)離心沉淀后取上清檢測。
小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(mcp-4/ccl13)elisa試劑盒 規(guī)格: 96t/48t
小鼠甲基化酶(methylase)elisa試劑盒 規(guī)格: 96t/48t
小鼠高鐵血紅蛋白(mhb)elisa試劑盒 規(guī)格: 96t/48t
小鼠褪黑素(mt)elisa試劑盒 規(guī)格: 96t/48t
小鼠黑色素細(xì)胞抗體(mc ab)elisa試劑盒 規(guī)格: 96t/48t
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶a(mmp-2/gelatinase a)elisa試劑盒 規(guī)格: 96t/48t
小鼠丙二醛(mda)elisa試劑盒 規(guī)格: 96t/48t
小鼠主要組織相容性復(fù)合體ⅲ類(mhc-ⅲ/h-2ⅲ)elisa試劑盒 規(guī)格: 96t/48t
小鼠主要組織相容性復(fù)合體ⅱ類(mhc-ⅱ/h-2ⅱelisa試劑盒 規(guī)格: 96t/48t
小鼠主要組織相容性復(fù)合體ⅰ類(mhcⅰ/h-2ⅰ)elisa試劑盒 規(guī)格: 96t/48t
小鼠巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(mdc/ccl22)elisa試劑盒 規(guī)格: 96t/48t
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(mip-3α/ccl20)elisa試劑盒 規(guī)格: 96t/48t
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(mip-2)elisa試劑盒 規(guī)格: 96t/48t
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1δ(mip-1δ/ccl15)elisa試劑盒 規(guī)格: 96t/48t
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(mip-1β/ccl4)elisa試劑盒 規(guī)格: 96t/48t