elisa酶聯(lián)免疫試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品實(shí)驗(yàn)過(guò)程中如何控制加樣和稀釋
1.elisa試劑盒混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。
(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為30ng/l,20ng/l ,10ng/l,5ng/l, 2.5ng/l)。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,elisa試劑盒然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑a50μl,再加入顯色劑b50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10.elisa酶聯(lián)免疫試劑盒終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
英文名稱(chēng) 規(guī)格: 48t/96t 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(tgfβ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) sus scrofa; porcine (pig)
英文名稱(chēng) 規(guī)格: 48t/96t 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(tgfβ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) bos taurus; bovine (cattle)
英文名稱(chēng) 規(guī)格: 48t/96t 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(tgfβ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) capra hircus; caprine (goat)
英文名稱(chēng) 規(guī)格: 48t/96t 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(tgfβ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) equus caballus; equine (horse)
英文名稱(chēng) 規(guī)格: 48t/96t 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(tgfβ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) danio rerio (zebrafish)
英文名稱(chēng) 規(guī)格: 48t/96t 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(tgfβ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) rhesus monkey (simian)
英文名稱(chēng) 規(guī)格: 48t/96t 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(tgfα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) homo sapiens (human)
英文名稱(chēng) 規(guī)格: 48t/96t 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(tgfα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) rattus norvegicus (rat)
英文名稱(chēng) 規(guī)格: 48t/96t 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(tgfα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) mus musculus (mouse)
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