簡(jiǎn)析氨基酸分析儀的原理和操作步驟

發(fā)布時(shí)間:2024-07-12
氨基酸分析儀是進(jìn)行氨基酸分離、衍生和檢測(cè)的全自動(dòng)化專用分析儀器,廣泛用于醫(yī)藥、食品、飼料、農(nóng)業(yè)、育種、醫(yī)學(xué)研究和地質(zhì)考察等領(lǐng)域。根據(jù)柱后衍生原理設(shè)計(jì)而成,分為水解蛋白分析系統(tǒng)和生理體液分析系統(tǒng),符合國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)和國(guó)際仲裁標(biāo)準(zhǔn)。
氨基酸分析儀的測(cè)定原理是利用樣品各種氨基酸組分的結(jié)構(gòu)不同、酸堿性、極性及分子大小不同,在陽(yáng)離子交換柱上將它們分離,采用不同ph值離子濃度的緩沖液將各氨基酸組分依次洗脫下來(lái),再逐個(gè)以路的茚三酮試劑混合,然后共同流至螺旋反應(yīng)管中,于一定溫度下(通常為115~120℃)進(jìn)行顯色反應(yīng),形成在570nm有吸收的藍(lán)紫色產(chǎn)物。
氨基酸分析儀的操作步驟:
1、樣品處理
(1)測(cè)定樣品中各種游離氨基酸含量,可以除去脂肪雜質(zhì)后,直接上柱進(jìn)行分析。
(2)測(cè)定蛋白質(zhì)的氨基酸組成時(shí)樣品必須經(jīng)酸水解,使蛋白質(zhì)變成氨基酸后才上柱進(jìn)行分析。
2、樣品分析
經(jīng)過(guò)處理后的樣品上柱進(jìn)行分析。上柱的樣品量根據(jù)所用自動(dòng)分析儀的靈敏度來(lái)確定。一般為每種氨基酸0.1μmol左右。測(cè)定必須在ph5~5.5、100℃下進(jìn)行,反應(yīng)進(jìn)行時(shí)間為10~15min,生成的紫色物質(zhì)在570nm波長(zhǎng)下進(jìn)行比色測(cè)定。而生成的黃色化合物在440nm波長(zhǎng)下進(jìn)行比色測(cè)定。做一個(gè)氨基酸全分析一般只需1h左右,同時(shí)可將幾十個(gè)樣品一起裝入儀器,自動(dòng)按序分析,最后自動(dòng)計(jì)算給出精確的數(shù)據(jù)。
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