兩性電解質(zhì)

發(fā)布時間:2024-07-05
別名:兩性電解質(zhì)載體;ampholyte solution; ampholime
性狀:近無色至淺黃色透明液體。有粘性。為一種相對分子質(zhì)量小于1000的,人工合成的多氨基多羧酸系列兩性化合物的復(fù)雜混合物。實際含量為40%的溶液,
用途:用于生物大分子蛋白胨和酶的等電聚焦電泳。
原理:它在大于其等電點的ph環(huán)境中解離成帶負電荷的陰離子,向電場的正極泳動,在小于其等電點的ph環(huán)境中解離成帶正由荷的陽離子,向電場的負極泳動。這種泳動只有在等于其等電點的ph環(huán)境中,即蛋白質(zhì)所帶的凈電荷為零時才能停止。
*條件:
1.可溶性要好,為了保證等電聚焦過程中ph梯度的形成和蛋白樣品的遷移,載體必須具有很好的溶解性能。
2.紫外吸收低,不發(fā)熒光。由于制備分離時,檢測蛋白質(zhì)的方法通常是測量280cm的吸光度,因此要求載體在280cm的吸光度盡可能低。
3.在等電點處必需有足夠的緩沖能力,以便能控制ph梯度,而不致被樣品蛋白質(zhì)或其他兩性物質(zhì)的緩沖能力改變ph梯度的進程。
4.在等電點必需的足夠高電導,以便使一定的電流通過,而且要求具備不同ph值的載體有相同的電導系數(shù),使整個體系中的電導均勻,如果有局部電導過小,就會產(chǎn)生極大的電位降,從而其他部分電壓就會太小,以致不能保持梯度,也不能使應(yīng)聚焦的成分進行電遷移,達到聚焦。
5.分子量要小,便于與被分離的高分子物質(zhì)用透析或凝膠過濾法分開。
6.化學組成應(yīng)不同于被分離物質(zhì),不干擾測定。
7.無毒、無生物學效應(yīng)。載體對哺乳動物的組織培養(yǎng),酶活性測定,免疫檢測或注射到小白鼠或大鼠中都沒有影響。
8.應(yīng)不與分離物質(zhì)反應(yīng)或使之變性??偲饋碚f,當一個的等電點介于兩個很近的pk值之間時,它在等電點的解離度大,緩沖能力強,而且電導系數(shù)高,這 就是好的載體。
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