b族維生素是一類水溶性小分子化合物,該類化合物不具備相似的結構,普遍以輔酶的形式廣泛參與到各種生理過程中 。目前已知的b族維生素主要為:維生素b1(硫銨)、維生素b2(核黃素)、維生素b3(煙酸)、維生素b5(泛酸)、維生素b6(吡哆醇)、維生素b7(生物素)、維生素b9(葉酸)、維生素b12(鈷胺素),今天來了解下維生素b1。
維生素b1或者硫胺素是一種提供糖類代謝需要的元素,幫助身體獲得能量的基本無機物。它能夠幫助保持中樞神經(jīng)系統(tǒng)的正常運行。缺乏維生素b1可能導致體重減少、微弱或者不規(guī)律的心跳速率、情緒失調和韋尼克腦病。
由于維生素b1有小粒徑和低分子量,是確定動態(tài)光散射(dls)濃度限制的理想樣品,本文通過dls測試維生素b1粒度。
01介紹
動態(tài)光散射(dls)是一種用來表征在懸浮液或溶液中顆粒和分子粒度的物理技術。此技術基于隨時間發(fā)生的散射光信號強度變化。顆粒產(chǎn)生散射光,顆粒的隨機運動產(chǎn)生散射光的波動。通過測試散射光,可以得到顆粒的運動速度;通過顆粒的運動速度,可以用斯托克斯-愛因斯坦方程計算出顆粒的水動力學粒徑。
做好dls測試的一個重要因素是使用正確的濃度。顆粒濃度必須足夠高以便產(chǎn)生好的散射強度。另一方面,濃度如果太高可能產(chǎn)生多重散射,得到一個錯誤的結果。
檢測角度也會影響結果。例如,側向散射(90°)適用于弱散射樣品,包括小顆粒和透明樣品;背散射(175°)適用于強散射樣品,包括大顆粒、高濃度或者渾濁樣品。安東帕litesizer 500的一個*功能是它的自動測試角度選擇,允許儀器選擇較佳的測試角度。此選擇基于樣品的連續(xù)透光率測試。此功能對于用戶處理未知或者不熟悉樣品非常有用。
圖|litesizer 500
02實驗
用去離子水制備三種濃度(50,80和100 mg/ml)的維生素b1溶液,然后在測試前用20 nm針孔過濾器(whatman ano*0)過濾。維生素b1的名義粒徑大小是0.6 nm。所有測試在25 ℃下,用安東帕litesizer 500操作8次以便驗證測試重現(xiàn)性。每個樣品的較佳測試角度由儀器自動選擇。
軟件中的自動角度選擇功能
03結果與討論
應用如圖2軟件的自動測試角度選擇功能,三種不同濃度維生素b1的平均水動力學直徑的測試結果如表1所示。系統(tǒng)自動為所有三個測試選擇側向散射(90°)。測試角度選擇基于安東帕litesizer 500對所有樣品連續(xù)監(jiān)控的透光率檢測。
維生素b1的名義粒徑是0.6 nm,因此100 mg/ml溶液的結果比50和80 mg/ml溶液更加準確。在此情況下,濃度對測試結果有重要影響,即濃度越低偏差越大。
表1 不同濃度維生素b1自動選擇測試角度的平均水動力學粒徑
每次測試重復七次
04結論
在這個研究中,dls測試合適的濃度可以通過測試小粒徑和小分子量樣品例如維生素b1來確定。
安東帕litesizer 500的自動測試角度選擇功能消除用戶在測試角度選擇方面,尤其針對未知或者不熟悉樣品角度如何選擇的困擾。