Lonza 4d-Nucleofector X小體積轉(zhuǎn)染應(yīng)用分享!

發(fā)布時(shí)間:2024-07-04
4d-nucleofector® x unit 是4d-nucleofector®系統(tǒng)四個(gè)功能模塊之一,用于2 × 104到2 × 107細(xì)胞量的轉(zhuǎn)染,x模塊中不同的電極模式(電極板或電極條)可選用相同的電轉(zhuǎn)程序,系統(tǒng)可自動(dòng)轉(zhuǎn)化應(yīng)用于不同模塊的參數(shù),客戶無需進(jìn)行額外操作,實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)的方便性與靈活性大化。
4d-nucleofector® x unit 特點(diǎn)
1.4d nucleofector 核轉(zhuǎn)系統(tǒng)x模塊可同時(shí)轉(zhuǎn)染2個(gè)100μl電極杯或1個(gè)16孔電極板條(每孔20μl)。
2.電極杯和電極板條可以選用相同的電轉(zhuǎn)程序。
3.每個(gè)電轉(zhuǎn)杯、每個(gè)孔可獨(dú)立設(shè)置程序。
4.操作簡(jiǎn)單靈活。
1)20ul與100ul)使用相同的操作手冊(cè)。
2)100ul 轉(zhuǎn)染細(xì)胞數(shù)量最多可達(dá)2 x 107。
3)20ul 轉(zhuǎn)染細(xì)胞數(shù)量最少到2 x 104。
5.通量多元化。
1)細(xì)胞通量的1-16個(gè)樣。
2)可預(yù)設(shè)50個(gè)以上參數(shù),針對(duì)100ul 體系。
3)可根據(jù)您的要求選擇20ul體系減少試劑費(fèi)用支出。
6.轉(zhuǎn)染原代細(xì)胞。
1)5種試劑盒可覆蓋所有原代細(xì)胞類型。
2)轉(zhuǎn)染優(yōu)化實(shí)驗(yàn)更加簡(jiǎn)易便宜(如果您的細(xì)胞在數(shù)據(jù)庫中沒有需要自行優(yōu)化)。
應(yīng)用案例分享
一,原代小鼠和人t細(xì)胞的ko
1.小鼠和人類t細(xì)胞中crispr/cas9介導(dǎo)的基因ko效率高達(dá)90%以上
2.各種細(xì)胞表面受體(ctla4,pd1),tf和細(xì)胞因子的ko
3.可以以類似的效率生成雙基因ko
二,原代人t細(xì)胞的ki
1.激活2d后進(jìn)行電轉(zhuǎn),cd3/28
2.90 g,10 min
3.solution p3,4d 96 well unit
4.eh 115
5.one million t cells/20 μl
6.2.5 μl rnp(50 pmol)+2μl hdr(4 μg)
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